植物的组织培养

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时间:2019-10-03

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1、天使花房手指玫瑰课题植物的组织培养通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢?组织培养营养繁殖扦插嫁接压条扦插嫁接压条无性繁殖繁殖速度快,保持原品种的遗传特性一、组织培养组织培养是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下产生愈伤组织,或进而生根发芽的过程,也称之为离体培养。请你根据组织培养的概念写出植物组织培养的一般流程?1、植物组织培养的一般程序:脱分化愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,

2、形成的一种由相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织.再分化由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。(实质就是细胞恢复分裂、分化能力)切取接种愈伤组织的形成试管苗的形成试管苗大规模培养移栽至土壤2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的?没有进行消毒处理,试管也没有做密封等。1、植物组织培养的原理(或理论基础)是什么?植物细胞具有全能性,即生物体的细胞,具有发育形成完整个体的能力。已分化的细胞具有植物个体发育的全套遗传信息(基因)4、形成愈伤组织的培养基和后面的培养基有什么区别?如何控

3、制培养过程中是生根还是生芽?3、植物组织培养需要用培养基来进行培养,它与前面学习的微生物培养基有什么区别和联系?5、实验过程你认为那些过程需要光照?细胞全能性表达条件:离体、一定的营养物质、激素和其他外界环境条件叶绿素的形成需要光照;光合作用进行也需要光照植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素再分化不需要光需要光胚状体制备MS固体培养基外植体消毒接种培养栽培二、实验操作过程移栽无菌水冲洗—70%酒精浸泡—无菌水冲洗—5%次氯酸钠浸泡—无菌

4、水冲洗—5%次氯酸钠浸泡—无菌水冲洗多次通常取生长旺盛部位(最好取具有分裂能力的部位)细胞,容易诱导脱分化和再分化为了获得无病毒的植株(作物脱毒)通常选取茎尖作为外植体几乎无病毒1、细菌污染:菌斑呈粘液状,界限比较明显,一般接种后1-2天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌细菌污染一般情况下可能是由接种人员造成2、真菌污染:菌斑呈绒毛状、絮状,界限不明显,伴有不同颜色的孢子接种后3-10天才能发现。主要是霉菌污染。真菌污染一般情况下可能是由植物材料灭菌不当造成本课题内容小结组织培养基础知识实验操作植物体的组织培养

5、影响组织培养的因素细胞分化细胞全能性组织培养过程营养激素环境条件MS固体培养基制备外植体消毒接种培养移栽栽培大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等1、培养基的配制(MS培养基)调PH培养基的分装灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌MS培养基有非常多的无机盐、使用时要经常更换;微生物培养基需要比较多的有机物。2、接种用70%的酒精喷雾使空气消毒,酒精或新洁尔灭搽洗工作台

6、并用紫外线照射20分钟(1)接种室消毒(2)无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。(3)材料的切取和接种(4)接种注意事项①每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为75%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定,一般胡萝卜3-4块,菊的茎或叶6-8块,也不要太少,以充分利用培养基中的营养成分和光照条件③插入时应注意方向,不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养

7、分3、培养无菌箱中培养,定期消毒,保持适宜的温度,光照4、移栽1、打开封口膜2、清洗转移至消过毒的蛭石或珍珠岩中幼苗长壮后,移栽到土壤中不同植物激素浓度,使用顺序和使用量使用顺序实验结果先生长素,后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高生长素细胞分裂素比值结果比值高时促根分化,抑芽形成比值低时促芽分化,抑根形成比值适中促进愈伤组织生长

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