人的唾液淀粉酶最适宜ph值的探索

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1、人的唾液淀粉酶最适宜ph值的探索一、作者：XXX二、地址：XXX三、摘要本实验用唾液淀粉酶为材料来观察酶活性受pH影响的情况，实验结果表明，在pH为单一变量时，pH值的变化会影响酶的活性。在pH6.6的时候,唾液淀粉酶有最大活性，由于实验受到各种因素的影响，所以得到的结果会与理论值有一定的误差。四、目的：测定酶的最适pH值，进一步了解酶牛物学活性五、关键词：pH值；酶；酶活性；唾液淀粉酶六、前言生物体内的酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质和核酸，前者是机体催化各种代谢反应最重要的催化剂。酶分子中

2、的许多极性基团。在不同的pH条件下解离状态不同，其所带电荷的种类和数量也各不相同，酶活性中心的某些必需基团往往仅在某一解离状态时才容易同底物结合或具有最大的催化活性。许多具有可解离基团的底物和辅酶的荷电状态也受pH改变的影响，从而影星酶对它们的亲和力。此外，pH还可以影响酶活性中心的空间构象，从而影响酶的活性。因此，pH的改变对酶的催化作用影响很大。酶催化活性最高时反应体系的pH称为酶促反应的最适pHo唾液中含有唾液淀粉酶，淀粉在该酶的催化下会随着时间的延长而出现不同水解程度，碘液与淀粉及其不同水解

3、程度的水解产物呈现不同颜色，用分光光度计测量哥溶液在660nm处的吸光度从而间接测出唾液淀粉酶的最适pH值。结果测得A在pH值6.0-7,6范围内变化并且随着pH的变化而变化,pH=6.6左右，吸光度值最低，所以所测唾液淀粉酶最适pH约为6.6。七、材料与方法1、材料与试剂1）人唾液中的唾液淀粉酶2）中试管、试管架、吸耳球、毛刷、小烧杯、漱口水3）37°C恒温水浴箱、分光光度计4）1.0ml、5.0ml、10.0ml刻度吸管、胶头滴管5）0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol磷酸氢二钠溶液、碘

4、液、蒸馆水2、方法（1）收集唾液：用少量蒸憎水漱口（为了清除口腔内食物残渣），收集唾液2ml,o（2）配制不同pH缓冲液pH值0.2mol/L磷酸氢二钠（ml）0.2mol/L磷酸二氢钠（ml）6.00.6154.3856.20.9254.0756.41.3253.6756.61.8753.1256.82.4502.5507.03.0501.9507.23.6001.4007.44.0500.9507.64.3500.650（3）摸索操作1）最适合加入的淀粉量（缓冲液pH=7）12345蒸憾水ml0

5、.90.90.90.90.9唾液稀释10倍数（参考），ml0.10.10.10.10」淀粉ml0.050.10・150.20.25混匀，37度水浴7.5分钟碘3滴最适宜所以应取淀粉0.15ml2）酶稀释倍数的探索，其中ph=7,如下表诒、称试12345678910蒸憾水ml0.90.90.90.90.90.90.90.90.90.9淀粉ml0.150.150.150.150.150.150.150.150.150.15唾液稀释倍数，取0.1ml1：31：41:51:61:71:81:91:101:1

6、11:12混匀，37度水浴7.5分碘3滴最适宜所以应取稀释倍数9倍3）唾液淀粉酶的最适宜ph值话称试管123456789淀粉ml0.150」50」50」50」50.150」50」50」5唾液稀释倍数，取0.1ml9倍9倍9倍9倍9倍9倍9倍9倍9倍Ph（取0.9ml）6.06.26.46.66.87.07.27.47.6混匀，37度水浴7.5分碘3滴吸光度值0.0270.0040.003—0.0060.0230.0330.1330.0720.081最好（4）作图在坐标纸上作出平滑曲线，取曲线最低点对

7、应的pH值，即为唾液淀粉酶的最适pH值八、结果图唾液淀粉酶的最适pH九、讨论（-）、理论上是“U”形的，导致出现形的原因有：1、操作原因比色杯光滑面不够光滑；2、在测定吸光度的时候拉得不到位；3、仪器（吸光计）不够精确；4、1…7号试管中除了淀粉…碘的络合物可以吸收660的光之外，还有唾液淀粉酶，也属于蛋白质，变性的量随着pH的变化而和应地发生改变，通过资料的查询，我们得以了解到变性前蛋白质的吸光度在280nm处最大，而变性后吸收峰也会改变。虽然如此，但是在660nm处会有一定的吸收值，所以也会影响

8、到最终结果的测定。（-）、对于岀现负值原因有下：1、调零时没调好，导致负值的出现；十、参考文献[11查锡良，周春燕.牛物化学[M],第七版，北京：人民卫生出版社，2010.[2]许冰，原媛，赵文献.pH值对酶活性影响实验观察[J]•临床合理用药杂志,2010.3（10）：35-35[3]杨玉萍，新乡学院学报（自然科学版）,2009,26（4）.[4]吴耀生主编.医学生物化学与分子生物学实验.北京，人民卫生出版社，2009.