《生化技术》课程实习实验指导书新格式(1)[精品]

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1、望的工程专地《生化技术》课程实习指导书张如新、任光云编著邵阳学院生物与化学工程系2012年10月实习项目一、超临界CO2萃取山茱萸中有效成分熊果酸1实习项目二、加携带剂超临界CO2萃取山茱萸有效成分熊果酸5实习项冃三、HPLC法测定萃取物中有效成分熊果酸的含量7实习项目一、山茱萸有效成分熊果酸的超临界CO2萃舟一、实验目的与要求1、掌握超临界CO2萃取的原理2、掌握超临界CO2萃取的操作3、掌握材料的处理与准备二、原理超临界CO2萃取是利用欲分离物质与杂质在超临界CO2中溶解度不同而达到分离的一种萃取技术。超临界流体兼有气

2、、液两者的特点，密度接近于液体，粘度和扩散系数接近于气体，它不仅具冇与液体溶剂相当的溶解能力，而且具冇优良的传质性能。超临界流体CO2萃取技术就是利用这种超临界流体的特殊性质，在高压条件卜•与待分离的固体或液体混合物接触，有效成分能溶解在超临界流体co2,通过调节系统的操作压力和温度，可萃取所需要的物质。随后通过降压或升温的方法，降低超临界流体CO2的密度,使萃取物溶解度降低，使目的物与超临界流体分离，萃取得到有效成分即目的物。三、材料与仪器1、材料：山茱萸2、CO2气体3、仪器：超临界CO?萃取装置4、植物样木粉碎机四、

3、操作步骤1、材料的准备选择优质的山茱萸材料，把其中的杂质去掉，称取1公斤山茱萸在70-100C烤箱中烘烤3〜4小时至完全干燥为止。用粉碎机粉碎（过40目筛），粗粉要再次粉碎，直到能过40目筛。2、萃取称取100g粉碎的山茱萸装入萃取缸并把萃取缸安装好，在压力为30MPa、温度为40"C下萃取3〜4小时。并按CO?超临界萃取装置使用说明书（见附页）开机进行萃取操作：（注意：一定要在熟练掌握原理和操作规则情况卜•才止式开机操作。）3、收集萃取物在收集萃取物之前，应准备4个洗干净并烘干的250ml锥形瓶。毎萃取1个小时收集一次，

4、具体操作按说明帖。最后收集完后，用封口膜封好锥形瓶，贴好标签并标好组号，时间等。保存好以备后而实验。4、记录应认真记好实验数据，包括实验的条件（如萃取温度、压力、萃取时间等），实验结果和实验现象等。5、仪器清理做完实验后，应依次用口来水，蒸馆水和无水乙醇清洗萃取缸和分离缸。清理打扫实验现场，包括实验台卫生，实验室卫生。特别捉醒注意关掉萃取装置总电源。附页CO2超临界萃取装置使用说明书图］C02超临界萃取流程图第一步：放空（关V28）关V28、V25及Vm打开V24（口J同时扌J开萃取缸卜的开关Vg）把萃取缸中的CO2放干净

5、，金萃取压力为零。如果不放空萃取缸取不下来，没放空CO/取下萃取缸很危险。关掉V25和V"时分离缸I和分离缸II不需放空。如需放空分离缸I和分离缸II,则不要关V25和V",也可同时打开分离缸I和分离缸II厂血的开关。第二步装料当萃取缸压力为零时，取下萃取缸，称取一定量的粉碎样品装入萃取缸，再按要求装好萃取缸，一定要拧紧螺栓。第三步萃取1、开电源2、开钢瓶（开到底再倒拧一圈）3、打开Vi和V284、开总电源，至三相电源指示灯全亮5、开冷循环、制冷开关。6、开萃取、分离I和分离II开关，并调节设定温度。7、当温度达到设定温度

6、后，开主泵开关，有显示后开RUN开关，主泵运转。开V25调节压力至设定压力并稳定此压力，开V"调节压力至8MPao8、当压力平衡后，关Vi（CO2在装置内反复循环，）如果压力过大，超过设定的安全压力时，主泵开关自动停止，此时需再次打开主泵开关，调节压力。9、萃取开始，并记录时间，萃取一定时间后，定时取样。10、取样时，开关稍打开，不能打开太大，边开边关。一次萃取完时，若继续萃取,应先关主泵开关，打开V25、Vno让CO2回流至钢瓶，并使各部分压力平衡，即萃取缸压力=分离I二分离II二贮罐压力。11、关Vi、V25、V28后

7、，使萃取缸放空，开Vg让萃取缸放空，也可以放V24让萃取缸放空。第四步携（夹）带剂萃取1、关Vi，量取一定的携带剂加入后面的携带剂罐小。2、打开V?和副泵开关。再打开后面的副泵放气阀，排除携带剂计量器与副泵Z间的气体，至冇携带剂流岀时为止，关副泵放气阀。3、等携带剂注完后，关副泵和V7。第五步关机关掉V］、V25和V28，开V24放空，再关主泵开关、制冷开关、冷循环开关、总开关和钢瓶开关。实习项目二、加携带剂超临界CO2萃取山茱萸有效成分熊果酸一、目的与要求1、掌握CO2超临界萃取原理与操作2、掌握携带剂对萃取结杲的影响3

8、、掌握加携带剂CO?超临界萃取的操作二、原理超临界CO2萃取是利用欲分离物质与杂质在超临界CO2中溶解度不同而达到分离的一种萃取技术。超临界流体兼冇气、液两者的特点，密度接近于液体，粘度和扩散系数接近于气体，它不仅具有与液体溶剂相当的溶解能力，而且具有优良的传质性能。超临界流体CO2萃取技术就是利用这种