高超,田秀芝,张璐,徐静,汪锋,卓志勇,戴蕴平,刘

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1、高超,田秀芝,张璐,徐静,汪锋,卓志勇,戴蕴平,刘国世*.外源褪黑素对卵母细胞体外成熟的影响.中国农业科学,2011,44(17):3634-3640外源褪黑素促进牛卵母细胞体外成熟的研究高超,田秀芝,张璐,徐静,汪锋,卓志勇,戴蕴平,刘国世*(中国农业大学动物科技学院,北京100193)作者简介:高超(1984-),男,黑龙江哈尔滨人,硕士研究生,研究方向为繁殖生理与胚胎生物技术.,E-mail:gaochao1984@yahoo.cn。通讯作者:刘国世(1972-),男,教授,博士生导师,研究方

2、向为配子胚胎生物技术。Tel.:010-62732735,Fax:010-62732735,E-mail:gshliu@cau.edu.cn摘要:【目的】探索外源褪黑素(melatonin,MT)处理对牛卵母细胞体外成熟的影响从而优化牛体外胚胎生产的体系。【方法】以屠宰场牛卵巢卵母细胞为材料,卵母细胞成熟过程中添加不同浓度的MT,观察统计体外受精后胚胎的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数。并应用放射免疫分析法检测血清、卵泡液和成熟培养液内MT与孕酮(P)、雌激素(E2)、促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(L

3、H)水平的变化并检测卵母细胞的活力和活性氧(ROS)的浓度。【结果】牛卵泡液中存在MT浓度与血清中相近,添加10-11mol·L-1MT组的P浓度2.01±0.33显著高于照组(P<0.05)。与对照组相比,10-9mol·L-1MT组卵裂率显著提高(77.81±7.06%比vs67.32±7.30%,P<0.05),并能提高囊胚率且囊胚细胞数显著高于对照组(90.30±28.74vs75.07±25.98,P<0.05);同时10-9mol·L-1MT组卵母细胞的活力高于对照组,并能降低卵母细胞内

4、的ROS含量但没有显著差异(P>0.05)。【结论】牛卵泡液中存在MT,适当浓度的外源MT能促进牛卵母细胞体外成熟。关键词:褪黑素;卵母细胞;体外成熟;活性氧;牛StudyontheEffectofExogenousMelatonin(MT)inBovineOocyteinvitroMaturationGAOChao,TIANXiu-zhi,ZHANGLu,XUJing,WANGFeng,ZHUOZhi-yong,DAIYun-ping,LIUGuo-shi(CollegeofAnimalScien

5、ceandTechnology,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100391)Abstract:【Objective】Tooptimizethebovineembryoinvitroproductionsystem,theeffectofexogenousmelatonin(MT)intheimprovingbovineoocyteinvitromaturationwasstudied.【Method】Immatureoocyteswereculturedinv

6、itroinmaturationmediumsupplementedwithdifferentconcentrationsof melatonin, afterIVFstatisticalanalysisembryo cleavagerate, blastocyst rateand blastocystcellnumber .Detecthormonelevels byradioimmunoassay infollicularfluid andthematuration  mediumandoocy

7、teviabilityandreactiveoxygen (ROS) levels.【Result】MT existsinbovinefollicular fluid andsimilarwithserum .In10-11mol·L-1 treatmenttheprogesterone (P) levels 2.01±0.33a(P<0.05 )ofmaturation mediumwassignificantlyhigherthanthatofcontrols. Comparedwiththec

8、ontrolgroup (67.32±7.30%),10-9mol·L-1MTtreatment  cleavage rate(77.81±7.06%)wassignificantly increased (P<0.05) andimprove theblastocystrate andcellnumber ofblastocyst wassignificantlyhigherthanthatofcontrols (90.30±28.74vs75.07±25.98,P

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