红肉蜜柚及其亲本琯溪蜜柚PSY基因的分离生物科学毕业论文

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1、ZHEJIANGNORMALUNIVERSITY本科生毕业设计(论文)(2009届)题目:红肉蜜柚及其亲本磅溪蜜柚FSY基因的分离学院:化学与生命科学学院专业:生物科学学生姓名:学号:05260204指导教师:职称:副教授合作导师:职称:完成时间:20年5月20日成绩:浙江师范大学本科毕业设计(论文)正文英文摘要1引言22.1植物材料2.2实验试剂2.3主要仪器和设备3方法3.13」」常用试剂配制3.1.2器具处理与准备3.1.3提取RNA3.2RNA的纯化3.3RNA提取质量与含星检测331总RNA的电泳

2、分析3.3.2总RNA含量与纯度测定3.4cDNA链合成341cDNA链的合成3.4.23.5基因的克隆及序列分析3.5.1基因的克隆3.5.2割胶回收3.5.3T■载体连接4纟HJ丿V4.1RNA电泳结果分析4.2RNA紫外分光光度计测定结果分析4.3纯化后RNA电泳结果分析4.4合成cDNA电泳结果分析4.54.6序列性分析5讨论1参考文献1致谢词11122233334445566667788234579红肉蜜柚及其亲本頊溪蜜柚PSY基因的分离化学与生命科学学院生物科学专业摘要:采用改良Bugos法提取

3、红肉蜜柚及其亲本垢溪蜜柚成熟杲实杲肉RNA,逆转录合成cDNAo根据NCBI网站公布的PSY基因全序列设计引物,采用高保真Tag聚合酶进行PCR扩增,将扩增产物连接到pUCm-T载体,转化至大肠杆菌DH5a,并送公司测序。比较发现,红肉蜜柚和頊溪蜜柚果肉PSY基因全长均为1317bp,编码439个氨基酸,序列比对结果显示两者PSY基因与柑桔属PSY基因同源性都相对较高,同源性最高达99%。关键词:红肉蜜柚;壬官溪蜜柚;PSY基因;基因分离;序列分析IsolatingPSYGenefromRed-fleshe

4、dSweetPomeloandItsParentGuanxiSweetPummelo(CollegeofChemistryandLifeScience,ZhejiangNormalUniversity,052No.04)Abstract:ThetotalRNAwasextractedfromtheripefruitofRed-fleshedsweetpomeloandGuanxisweetpomelousingimprovedBugosRNAextractionmethod,thenweresynthesi

5、sedcDNAbyreversetranscriptasekit・Atthesametime,wedesignedprimersforPSYgenesequencesaccordingtotheinformationPSYgenesequencesonNCBI,high-fidelityTaqpolymerasewereusedforPCRamplificationandcDNAasthetemplate.Finally,thePCRproductswereconnectedtopUCm-Tvector,t

6、hensequencedandanalyzedthesequences・SequeneeanalysisindicatedthatthecDNAfragmentwas1317bp,encodinga439aminoacidproteinandhaved99%identitywiththoseofothercitrusinthehighestlevel.TheresearchingmaybeessentialforthemolecpLarmechanismofPSYgenemutation.KeyWords:

7、red-fleshedsweetpomelo;guanxisweetpummelo;PSYgene;geneisolationing;sequenceanalysis1引言芽变是体细胞突变的一种,即突变发生在芽分生组织细胞中,当芽萌发长成枝条,表现岀与原来植株不同的性状即为芽变,经突变的芽长成枝条经繁育可成为变异单株,是果树等多年生作物的一种特殊育种途径⑴。红肉蜜柚源自頊溪蜜柚芽变,是平和县小溪镇厝丘村果农林金山于1988年在自家果园发现的优良芽变株⑵。之后,由福建省农科院果树研究所及平和县农业局等组成课题

8、组,进行新品种的选育、保护和繁殖工作。经专家3年实地跟踪验证,认为该品种具备新颖性、特异性、一致性和稳定性,并于2006年正式通过了专家组的品种认定,正式命名红肉蜜柚⑶。经检测:红肉蜜柚的微量元素比野生型跻溪蜜柚含量更丰富,所含的黄酮类和类胡萝卜素共同具有抗癌作用,比其它柚类更具防心脏病,降血脂功效。红肉蜜柚也是目前国内外已选育出的红肉类型柚中果形最大,品质最优,成熟期早呈色最红、有益天然色素含量最高的品种,其开

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