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1、实验一显微镜及制片技术目的与要求材料与仪器实验内容目的与要求1、了解显微镜的构造及维护。2、初步掌握使用显微镜地方法。4、了解普通显微镜的成像原理及光路图3、了解光学显微镜的主要类型.生物显微镜，测微尺，“E”字玻片标本，香柏油等材料和仪器实验内容二、植物制片技术三、绘图法一、显微镜（一）.显微镜成像原理（二).显微镜的类型(三).显微镜的构造（四）.使用显微镜的主要步骤和方法（五）.放大率（六）.测微尺的使用一、显微镜（一）显微镜的成像原理1.显微镜的光学原理2.显微镜的照明原理（1）临界照明（2）柯拉照明被检物AB放在物镜(O1)下方的
2、一倍焦距之间，则在物镜(O1)后方形成一个倒立得放大实像，这个实像正好位于目镜(O2)的下焦点之内，通过目镜后形成一个放大的虚像A2B2，这个虚像通过调焦装置使其落在眼睛明视距处，即25cm，使所看到的物体最清晰，也就是虚像A2B2是在眼睛晶状体的两倍焦距之外，在眼球后的视网膜形成一个倒立的A2B2缩小像A3B3.1.显微镜的光学原理临界照明：光源经扣光镜后哦汇聚在被检物体，光束狭而强，这是它的优点，但是光源的灯丝像与被检物体的平面重合，这样就造成被检物体的照明呈现出不均匀性，在有灯丝的部分则明亮，无灯丝的部分则暗淡，不仅影响成像质量，更不
3、适于显微照相。柯拉照明：照明光路中的光学组件包括光源、集光器、视场光栏、孔径光栏、聚光器和物台。在柯拉照明光路中，在集光器透镜两侧，灯丝和孔径光栏位一对共轭面，灯丝的像成在孔径光栏的平面上。在聚光器透镜两侧，视场光栏和物台为一对共轭面，视场光栏的像呈现在舞台上，因此柯拉照明比临界照明要优越。一是照明均匀。二是通过调节视场光栏的大小和位置可以可以控制标本平面上照明区域的大小和位置。（二).显微镜的类型电子显微镜使用电子束作光源的一类显微镜,以特殊的电极和磁极作为透镜代替玻璃透镜,能分辨相距0.2左右的物体放大倍数可80-120万倍光学显微镜以
4、可见光作为光源,用玻璃制作透镜的显微镜.其有效放大倍数可达1250倍,最高分辨力为0.2微米.显微镜可分为光学显微镜和电子显微镜光学显微镜可分为单式显微镜和复式显微镜。单式显微镜结构简单,扩大的是方向一致的虚像.复式显微镜结构比较复杂,放大倍数较高,包括普通生物显微镜,暗视野显微镜,相差显微镜,荧光显微镜等.光学显微镜单筒复式普通生物显微镜下一页双筒复式普通生物显微镜普通显微镜的放大倍数10X4低倍观察10X10中倍观察10X40高倍观察10X100油镜普通生物显微镜的放大倍数物镜是决定显微镜质量好坏的重要部件,放大倍数有10,40,油镜1
5、00倍,目镜放大倍数有5,10,16倍.暗视野显微镜特点是该显微镜具有暗视野聚光器，使光线不直接进人物镜，故呈暗视野。暗视野Darkfieldmicroscope根据Tyndall效应原理设计，在黑背景下观察物体的外部细节，分辨率高该显微镜适用于观察细胞内微小颗粒，例如线粒体、细菌运动等。荧光显微镜是用以观察细胞及组织内荧光物质的分布。它是装有、能产生紫外线（短波长）的光源及系列滤片装置的显微镜。：相差显微镜的特点①装有不同大小环状光阑的聚光器。②物镜内装有位相板。③中心望远镜装置。相差显微镜的基本原理是通过上述装置。把透过标本的可见光的相
6、位差变成振幅差，从而提高了标本内各种结构之间的对比度，使标本中的结构清晰可辨。使用电子束作光源的年一类显微镜,以特殊的电极和磁极作为透镜代替玻璃透镜,能分辨相距0.2左右的物体放大倍数可80-120万倍。透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像，投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。透射电镜的分辨率为0.1～0.2nm，放大倍数为几万～几十万倍。扫描电镜是用极细的电子束在样品表面扫描，将产生的二次电子用特制的探测器收集，形成电信号运送到显像管，在荧光屏上显示物体。（细胞、组织）表面的立体构像，可摄制成照片。电子显微镜点击看图点击
7、看图透射电镜（三）.显微镜的构造显微镜的基本构造包括两大部分,光学系统和机械系统,机械系统有镜座,镜柱,镜壁,镜筒,物镜转换器,载物台,调焦螺旋,聚光器调节螺旋.光学系统有物镜,目镜,反光镜,聚光器,虹彩光圈.下一页下一页下一页下一页下一页下一页（四）.使用显微镜的主要步骤和方法1、低倍镜观察2、高倍镜的使用3、油镜的使用4、显微镜使用后整理1、低倍镜观察（1）对光和放置切片下一页（2）调焦（3）低倍观察:将需观察的材料放到最有利的位置上,根据材料的颜色厚薄,成像反差再调节,如:视野太亮可下降聚光器或调小光圈.2、高倍镜的使用（1）.选取目
8、标:用低倍镜选取目标,并移至视野中央,换上高倍镜.（2）.调整焦点:换上高倍镜后视野中即有模糊图象,调节细准焦螺旋使图象清晰0（3）.调节亮度,因高倍镜视野较暗需升高聚光器,或放
