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《鱼腥藻藻蓝蛋白提取优化和抑菌研究【开题报告】》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、毕业论文开题报告生物科学鱼腥藻藻蓝蛋白提取优化和抑菌研究一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义藻蓝蛋白是一种深蓝色粉末，色泽美观。它既是一种蛋白质，又是一种极好的天然食用色素，同时又是良好的保健食品。据科学研究表明，藻蓝蛋白具有刺激红细胞集落生成，类似红细胞生成素(epo)的作用；藻蓝蛋白具有补血、调整白血球和提高淋巴细胞活性的作用；增加体能、促进红血球增长，能增进机体免疫功能，促进生长发育；藻蓝蛋白还具有抑制某些癌细胞的作用；具有很高的营养价值和医疗价值。藻蓝蛋白作为天然食用色素，它可以改善食品的色泽，不仅能提高食品的档次，而且能增加食
2、品中的功能成份。藻蓝蛋白是少见的色素蛋白之一。它不仅颜色鲜艳，而且本身是一种营养丰富的蛋白质，其氨基酸组成齐全，必需氨基酸含量高。藻蓝蛋白是水溶性色素，清亮鲜艳，外观悦目可爱，可作为食品、化妆品的添加剂。目前藻蓝蛋白的产品绝大部分来自螺旋藻，但由于螺旋藻需在碱性环境(pH11)下生产，在培养过程中需添加大量NaHCO3，不仅增加成本，同时产品中残留的NaHCO3不易去除干净。不适合作食品添加剂及药物等使用。同时，生产中螺旋藻藻体要清洗三遍才能用于提取，因此培养基和清洗液的排放也会对环境造成污染。鱼腥藻(Anabeana)属淡水藻，培养过程中操作简单易
3、控制，生长速度快、产量高、成本低、适应性强，一年四季均可生产，同时鱼腥藻还具有固氮能力，产生的有机氮作为饲料蛋白。因此，利用鱼腥藻提取藻蓝蛋白，不仅可以避免采用螺旋藻提取藻蓝蛋白的高成本，高污染的弊端，也可大大降低成本，是一种价廉易得的藻蓝蛋白资源。因此对从鱼腥藻中提取藻类蛋白工艺进行改进就非常有必要，本实验不仅在提取工艺方面进行改进并对提取获得的藻类蛋白进行各种测得以获得更多的情况，方便他人对藻蓝蛋白的理解和应用。三、研究步骤、方法及措施：1鱼腥藻的扩大培养，在武汉水产所购买藻种，配置培养基，在1000ml的锥形瓶中24摄氏度光照培养。2藻蓝蛋白的
4、提取藻蓝蛋白是一类水溶性光合色素蛋白复合物，可用低离子强度的中性磷酸盐缓冲液提取，制备藻蓝蛋白的粗提物,将鱼腥藻的培养液在3000r/min离心10min取沉淀,取同体积的磷酸缓冲液(pH7.0)混匀,置于冰箱内反复冻融5次,再加入适当的磷酸缓冲液在混匀器上混匀4℃下4000r/min10min,收集蓝色上清液,将所得上清液用55%饱和度的硫酸铵溶液盐析一个小时左右，待硫酸铵于早蓝蛋白完全混合后4℃下5000r/min离心l0min,将沉淀收集起，既为藻蓝蛋白初提液。在紫外分光光度议上分别测在280nm和620nm时的吸光度，来计算初提液中藻蓝蛋白的
5、含量。藻蓝蛋白初提液的纯化将提取得到的初蛋白液，加入一定量无菌水离心透析，除去大分子杂质，准备下一步进行高效液相色谱，将每个峰的蛋白分别收集起来，用于下面的实验。讨论藻蓝蛋白的各种活性。藻蓝蛋白的抑菌作用菌液培养将大肠杆菌、沙门氏菌，等菌种分接种于肉汤培养基中，37摄氏度下摇瓶培养使菌液浓度达到4-10小时，使菌液浓度达到一定程度粉溶液的配制卵转铁蛋白、乳铁蛋白、蛋黄免疫球。将已经纯化的藻蓝蛋白配置成一定浓度，作为蛋白液备用。按20%蛋白液80%菌液相互混合，并测的初始OD值，在放在37摄氏度培养箱中无菌培养，过夜后继续测溶液的OD值，另外一组不加蛋
6、白液用20%无菌水代替同样处理培养记录数据。比较两组数据，推测藻蓝蛋白的抑菌活性。藻蓝蛋白的电泳去已经纯化的藻蓝蛋白-70摄氏度冻干，取各个峰值时获得的样品进行SDS-TAGE电泳，用表样蛋白做对照测个峰值蛋白的分子量。四、参考文献[1]孟春晓,高政权.钝顶螺旋藻藻蓝蛋白提取和纯化工艺研究进展[J].食品研究与开发,2007,28(9):151-154.[2]邹宁，孙东红，衣建龙等.鱼腥藻藻蓝蛋白的提取[J].水产养殖.第26卷第1期2005年1月1日:6-7.[3]杨立红,邹宁,孙东红等.鱼腥藻藻蓝蛋白的提取[J].生物活性物质分离与提取.2005
7、年第31卷第2期：135-138.[4]张少斌,刘慧,刘国琴等.螺旋藻别藻蓝蛋白的纯化、理化特性与结晶[J].微生物学通报.2006年33(5):31-34[5]李春霞,吴淑贤,蔡春尔等.条斑紫菜藻红、藻蓝蛋白逐级放大的纯化工艺[J].中国生物工程杂志:67-72[6]杨严俊,张亚辉,周培江.几种免疫活性蛋白抑菌活性的测定[J].食品工业科技.2003年第7期：24-25[7]范敏，王雪青，段开红等.螺旋藻藻蓝蛋白光敏作用的研究进展[J].生命科学.第20卷第2期2008年4月：284-286[8]杨立红，王晓洁，钟旭升等.鱼腥藻藻蓝蛋白的抗氧化作用
8、[J].食品科学2006,Vol.27,No.12：208-212[9]汪家政，范明.蛋白枝术手册fX71.
