临床实验诊断技术

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1、临床实验诊断技术第一节临床血液学检验和尿液检验随着基础医学和科学技术的飞速发展,临床血液学检验和尿液检验的新仪器的大量引进,因其具冇检测精密度高、分析速度快、操作易标准化等优点,止好弥补了手工分析的弱点,使检验医学从传统的手工操作向白动化方向发展,更好地为临床服务。一.血细胞分析仪-)检测原理现代血细胞分析仪虽然型号不一,但检测原理基本分二大类1.电阻抗检测原理根据血细胞非传导电性的性质,以対电介质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化为基础。当一个细胞通过小孔时小孔感应区内电阻增加,于瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。经过对各种细胞所产生脉

2、冲人小的电了选择,可以区分不同种类的细胞,并进行分析。2.光学检测原理当细胞悬液在鞘流液的约朿下,细胞排成单列,由喷嘴喷出形成了细胞液柱,与入射的激光束垂直相交,使激光产生散射。低角前向散射光主要用于检测细胞大小;高角前向散射光主要用于检测细胞内部精细结构和颗粒物质。光散射的变化引起电脉冲信号的改变,其人小与细胞体积相关,其数量反映了通过激光检测区细胞的数量。二)性能特点1.检测速度快、样品用量少。2.检测项目多,一般可检测的参数达20项左右。3.高精密度,检测片细胞各参数的变异系数(CV)一般均低于5%-10%o4.低污染率,一般均低于1%。5.直观

3、性强,有数值报告;直方图和散点图行显示及文字性提示。6.完善的报警功能,对异常检测结果能显示相应的报警信号。三)临床应用1.血细胞检验多参数化通常包括红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血红蛋白(Hgb)、1(11.小板(PLT)、红细胞压积(Het)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含fi(MCH)>平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度(RDW)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)、白细胞三分类或五分类的数值和冇分比(%)等。2.细胞直方图的应用(1)白细胞直方图从图形的变化可故

4、计被检血样中细胞群体的变化,但这种变化是无特异性的。如图小间细胞群可包括大淋巴细胞、原始细胞、幼稚细胞,其屮任一细胞增多均可使直方图产牛•相相似的变化。因此,开常直方图的出现就提示要进行血片镜检。(2)红细胞直方图直方图行的变化再与其他参数结合分析,对贫血的鉴别诊断颇有价值。(3)血小板肓方图当待检样木屮小细胞增多或岀现细胞碎片,或血小板聚集时,会影响实验结果,血小板体积直方图均能反映这些变化。二.全自动血液凝固分析仪血栓与止血的检测从传统的手工方法发展到全自动血液凝固分析法,可定量分析与凝血、抗凝及纤溶有关的多种因子,使血栓与止血的检测变得更为简便、

5、迅速、准确而可靠。(一)基本原理目前凝血仪使用的凝固法大致分为三类:1.生物学(凝固)法(1)光学法乂分成二种:散射比浊法和透射比浊法①散射比浊法根据待检样品在凝固过程中散射光的变化来确定凝固终点的检测方法。②透射比浊法根据待检样品在凝固过程中吸光度的变化來确定凝固终点的检测方法。(2)电流法将待检样品作为电路的一部分,由于纤维蛋口具有导电性,可利用电路的连通与否来判断纤维蛋口的形成与否,即判断凝固终点。(3)黏度法又称磁珠法。在待检样品中加入小铁珠,利用变化的磁场使小铁珠产生运动,随着血浆的凝固,血浆黏度增加,小铁珠的运动强度减弱,仪器根据小铁珠运动

6、的变化来确定凝固终点。2.生物化学法通过测定产色物质的吸光度变化来推算所测定物质的含址。3.免疫学法以被测物质作为抗原,用免疫动物的方法制备相应的抗体或应用单克隆技术制备单克隆抗体,利用抗原、抗体的特界性反应对被测物质进行定量分析。(二)临床应用1・凝血系统凝血系统的筛选试验,包括凝血酶元时间(PT)、活化部分凝血酶元时间(APTT)、凝血酶时间(TT)测定;也可进行单个凝血因子含量或活性的测定,如纤维蛋白原(Fib)及凝血因子:II、V、VIILIX、X、XI、XIL2.抗凝系统抗凝血陆(AT)、a■抗纤溶酶、蛋白C(PC)、蛋白S(PS)、抗活化蛋

7、口C(APCR)o1.纤维蛋白溶解系统抗纤溶酶原、可溶性纤维蛋白单体、纤维蛋白降解产物(FDP)、交联型纤维蛋白降解终末产物,又称D・D二聚体(D・dimcr)。4临床用药(生物制品)的监测当临床应用普通肝素、低分子肝素及口服抗凝药物如华法令及输注血液制品(因了VIII浓缩剂等)时,可用血凝仪进行监测。一.血液流变仪血液流变学主要研究血液及其组成成分的流动与变形的规律,血液流变性能异常可导致血液循环和微循环的障碍,故血液流变学在某些疾病的诊断、预后判断和预防等方血有重要应用价值。(一)血液黏度测定方法黏度是血液的璽要力学性质,也是血液流变学重要的研究内

8、容Z—,常用黏度计来测定,按其原理可分为两大类:1.毛细管黏度计一定体积的血液通过貝有一定长度

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