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1、网织血小板检测方法的改良及临床应用（作者:单位:邮编:）【关键词】血小板减少;，网织血小板;，流式细胞术［摘要］目的改良网织血小板（RP）检测方法并探讨其临床应用价值。方法以嘍哩橙（TO）作为RNA的荧光染料，利用流式细胞仪检测30例正常人（正常对照组）和48例各种血小板减少症外周血中含有RNA的RP百分数及RP绝对值，后者包括原发性血小板减少性紫瘢（ITPX再生障碍性贫血病人（AA）及初治急性白血病病人。结果ITP病人RP百分数明显高于正常对照组（F=65.29,q=10.26,P0.01），而RP绝对值明显低于正常对照组（F
2、=85.07,q=19.59,P0.01）;AA病人RP百分数及绝对值均低于正常对照组（q=3・47、16.41,P0.05.0.01）;AL组病人RP百分数与正常对照组比较无明显差异（q=0.51,P0.05）,但其RP绝对值明显低于正常对照组（q=15.46,P0.01L结论改良了传统的网织血小板检测方法并建立了简便、稳定的检测手段，为临床各类血小板减少性疾病的诊断提供了可靠的方法。［关键词］血小板减少；网织血小板；流式细胞术[ABSTRACT]ObjectiveToimprovethemeasurementofreticu
3、latedplatelets(RPs)andtoexploreitsclinicalapplication.Methodsllsingthiazoleorangeasafluorescentdye,RPsweremeasuredbyanalyzingtheRNAcontentinplateletsin30normalcontrolsand48variousthrombocytopenia,i.e.idiopathicthrombocytopenicpurpura(ITP),aplasticanemia(AA),andinitia
4、lly-treatedacuteleukemia(AL),withflowcytometry.ThepercentageandabsoluteResultsCom-paredwiththenormalgroup,ITPpatientshadavalueofRPswerecalculated.significantlyhighpercentagelowabsolutevalueofRPsF=65.29,q=10.26,P0.01)andF=85.07,q=19.59,P0.01);inAA,boththepercentageand
5、absolutevalueofRPswereatlowlevels(q=3.47,16.41;P0.05,0.01).TherewasnodifferenceofRPpercentagebetweentheALandnormalcontrols(q=0.51,P0.05),buttheabsolutevalueofRPsinALwassignificantlylowerthanthecontrol(q=15.46,P0.01).ConclusionThetraditionalmethodofreticulatedplatelet
6、detectionhasbeenimprovedandasimpleandstableoneestablished,whichprovidesareliablemethodfordiagnosisofvariousthrombocytopenia・[KEYWORDS]thrombocytopenia;reticulatedplatelet;flowcytometry网织血小板（RP）与网织红细胞一样都是刚从骨髓中释放岀来的未成熟细胞[1],RP与正常血小板相比胞浆内含有少量mRNA,体积较大，而且有更强的活性[2]□随着血小板的
7、成熟，胞浆内mRNA逐渐消失，体积逐渐变小。测定外周血RP可以比较精确地反映骨髓血小板生成情况。荧光染料嘍瞠橙（TO）可以直接穿过细胞膜进入胞浆，当它与RNA结合后，其发射荧光强度的能力可增大3000倍。我们对检测方法进行了改良并探讨外周血RP数值的变化在各型血小板减少性疾病中的诊断价值，现将结果报告如下。1资料与方法1.1研究对象我院2003-2004年住院血液病病人48例，其中特发性血小板减少性紫瘢（ITP）21例，再生障碍性贫血（AA）15例，白血病初治病人（AL）12例，诊断均符合《血液病诊断及疗效标准》[3]□正常对照
8、组为正常健康人30例，为我院门诊体检者,男14例，女16例;年龄16-72岁;血小板计数（100-300）x109/Lo1.2试剂与仪器TO购自美国Sigma公司，CD41-PE试剂盒为法国Immuno-teach产品。EPICSXL型流式细胞仪为Coulter
