基于苷元特征显色检测苜蓿总皂苷研究

《基于苷元特征显色检测苜蓿总皂苷研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、基于昔元特征显色检测苜蓿总皂昔的研究摘要苜蓿总皂昔(Totalofalfalfasaponins,TAS)是苜蓿属植物屮含冇的一类重要的牛物活性成分。近年研究表明，苜蓿皂昔具冇显著的降血脂和抗动脉粥样硬化等多种独特的生理功能。同时它还是一种重要的发泡剂、乳化剂、稳定剂和风味改良剂。本文首先以提取率为考察指标，利用响应而分析优化了提取苜蓿皂昔的工艺条件；以大孔吸附树脂AB-8和阳离子交换树脂联用富集、纯化总皂昔类成分；用制备高效液相色谱法分离出一种皂苜单体并用ESI/MS法分析确证其结构；在此基础上，系统地

2、研究了基于苜蓿皂廿廿元比色法测定苜蓿总皂廿含量的方法。其研究的主要结果如2研究和比较了2种不同的TAS提取方法，(1)以乙醇溶液为溶剂,通过对影响萃取效果的单因素分析，建立响应面分析实验，优化提取工艺条件。最佳提取条件为：提取温度45°C、提取时间154min、液料比(ml/g)=10:l、乙醇浓度63%,提取1次，提収率为78.7%。(2)超声法提取TAS,结果表明：用20kHz超声波捉取60min,提取率为97.41%。这种方法的提取率与加热搅拌提取2次(合计提取时间240min)的皂昔提取率基本相等

3、。脱脂苜蓿根粉的醇提液中含有糖类物质和色素，釆用大孔树脂吸附和阳离子交换树脂去除提取液中的杂质物质。实验确定AB・8树脂的吸附条件为:溶液pH为8〜9、NaCl浓度为0.80%、苜蓿皂昔溶液的初始浓度以8mg/ml为宜、上样流速为3BV/h、洗脱液为95%的乙醇。收集洗脱液并减压蒸干后，溶在15%的甲醇屮，然后过阳离子交换柱脱色。TLC鉴定结果表明，纯化后的产甜屮含冇苜蓿皂昔类成分纯度高。以制备高效液相色谱法从脱脂苜蓿根粉乙醇提取并经过上述分离初步纯化的粗提物中分离出一种皂昔单体，通过ESI/MS分析确证

4、其结构为3-O-[P-D-glucopyranosyl]-28-O-[p-D-xylopyranosyl(l—>4)-a-L-rhamnopyranosyl(l—>2)-a-L-arabinopyranoside]medicagenate。建立了利用皂昔元特征显色测定苜蓿皂昔含量的定量方法。以香草醛■高氯酸为显色剂，冰醋酸为溶剂，使皂背元显色，用分光光度法在波长为560nm处测定苜蓿皂昔元的含量。以3-O-[p-D-glucopyranosyl]-28■0■[卩・D-xylopyranosyl(1-^4)

5、-a-L-rhamnopyranosyl(1-^-2)-a-L-arabinopyranoside]medicagenate酸水解后的U元为标样，建立的标准方程为y=0.003lx,R2=0.9993,该冋归曲线高度显著，线性和稳定性可靠。关键词：苜蓿皂廿，提取，纯化，制备，大孔树脂STUDIESONTHEROBUSTDETERMINATIONMETHODOFALFALFASAPONINSABSTRACTTotalofalfalfasaponins(TAS)isanimportantcomponentin

6、medicplant,whichmaybebiologicallyactiveinreducingplasmacholesterolandguardingagainstatherosclerosis・Soithasagoodprospectofclinical7applicationandahighvaluetobedevelopedintoanewremedy.Inaddition,saponinisanimportantvesicant,emulsion,steady-reagentandflavor

7、-reagent.Inthisthesis,thetechnicalparametersofwaterandethanolrefluxextractionwasoptimizedbyresponsesurfaceanalysis;aTASpurificationmethodwasestablishedwithmacroporousresinAB・8adsorption-cationexchangeresinchromatography;atriterpeneglycosidefromalfalfaroot

8、sanditsmolecularstructurebyHPLC-ESI/MSanalysis;acolorimetricmethodforquantitativeanalysisofTASwasestablished.Themainresultsareshownasfollows:Twomethodsforextractingtotalsaponinsfromalfalfawerestudied.(1)Ethanolextra