沿阶草炭疽病的病原鉴定及病害调查（精品）

《沿阶草炭疽病的病原鉴定及病害调查（精品）》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、实验三沿阶草炭疽病的病原鉴定及病害调查沿阶草，又名书带草、不死草、麦门冬、铁韭菜、细叶麦冬、蒲草、绣墩草，属百合科沿阶草属，学名：Ophiopogonjaponicuscv.为多年生常绿草木。根状茎短粗,具细长匍匐茎，有膜质鳞片。须根端或中部膨大成纺锤形肉质块根。叶线形，丛生，长10〜30cm,宽0.4cm左右。在野外，沿阶草常生于沟旁及山坡草丛屮，喜半阴，湿润而通风良好的环境，耐寒性强⑴。在人工绿化上，沿阶草可作花坛边缘材料和地被植物，布置在山石旁、庭园、台阶下或沿路两旁栽植。也可盆栽观赏。沿阶草抗性强,不易发生病虫害，无论盆栽或地栽均较简便，

2、无需精细管理。因此沿阶草由于经常做为草坪绿化植物之一，具有很强的经济价值。在病害调查过程屮，于福建农林大学病毒所附近、北区1#楼后、北区2#楼后等楼旁的草坪中发现沿阶草的一种常见叶部病害，虽然为害不严重，但是防治不严格可能会导致整片草坪得病，也降低了其总体的观赏性。本实验针对这种病害展开调查，鉴定其病原为炭疽杆菌，并探讨该病害的发病特点与防治措施。1调查地点与调查方法1」调查时间：2009年11月24n——11月24口（周二病理实验课课前）1.2调查地点：福建农林大学北区1#楼后沿阶草草坪，1.3调查面积：6米X50米1.4症状观察与病原鉴定：到

3、草坪屮采集发病植株标本（图1）,观察沿阶草发病实状，并对症状特点进行数码摄影、病害病原分离培养、纯化、镜检，同时通过切片，在显微镜下观察病原形态特征，并进行显微拍照，比对分离培养的病原形态特征，参考书籍文献，确定沿阶草叶片焦黄的发病病原。分离纯化的具休操作是切取沿阶草病、健交界处的病组织一小块（约0.2CM左右）,先置于70%乙醇屮浸3〜5s,接着再把病组织移入0.1%升汞屮浸1.5min,然后再把病组织移入灭菌水中漂洗3遍，最后把病组织移到PDA平板培养基上培养。一段时间后,切取菌落颜色较一致的边缘菌丝约5x5mm至新的PDA平板培养基纯化培养

4、⑵。并拍摄培养皿的病原菌落的图片。图1病害标本采集地点1.4发病率与病情指数：五点取样，以该草坪四角以及草坪中间各取一片面积为20X20CM的草坪面积，每点约9株，以这五点进行病情调查。发病率公式为：发病率（％）=（调查病叶数X100%）/调查总叶数根据症状特点进行病情分级：病情指数公式：病情指数二刀［各级叶数X该级代表值］X100/［调查总叶数X最高级代表值］病情分级为0、1、2、3、4、5级，具体分级标准如下（图2）:0级：健叶，无任何病斑或病斑极其微小1级：病斑淡黄色，尚未形成褐色斑纹，病健交界处不明显。发病部位占叶而积少于5%2级：病斑形

5、成褐色斑纹，附近形成黄色晕条，病健交界明显。发病部位占叶面积6〜10%3级：病斑形成褐色斑纹，附近形成黄色晕条，病健交界处明显。叶尖枯焦，发病部位占叶面积11〜20%4级：病斑形成褐色斑纹，附近形成黄色晕条，病健交界处明显。叶尖枯焦，发病部位占叶面积20〜30%5级：病斑形成褐色斑纹，附近形成黄色晕条，病健交界处明显。发病部位至叶尖均枯焦，整片叶几乎枯死。发病部位占叶面积大丁•30%0级1级2级3级4级5级图2沿阶草炭疽病分级标准示意图2结果2.1症状观察叶片受害，初为红褐色小圆斑点，后变为圆形、近圆形、椭圆形等不规则形病斑,中央初期为灰白色，后

6、发展为灰黑色，边缘有红色或紫色晕圈，病部和健中交界不明显（图3）,直径1〜10mm,病部产生黑色小点（图4）。我校明德楼前的花圃部分苗株发病严重，病害症状表现明显，发病率相对较高（图5）。图3千FI红斑点病局部观图4千Fl红斑点病病斑示小黑点图5沿阶草发病植株整体观据文献报道，TH红常见病害为链格抱叶斑病，英症状与此次我们调查的病害症状具有一定的相似性，但其差别表现在链格砲叶斑病病部产生灰褐色霉层⑶，而不是黑色小点。2.2病原鉴定千口红斑点病病原为売二｛AscochytachrysanthemiF.L.Stev）。取切片镜检，分生抱子器褐色，圆形

7、至扁圆形，初埋生，后暴露，单个或分散，孔口小（图6）o分生抱子椭圆形或K圆形，无色，双细胞，1隔膜，但隔膜常不清楚，分隔处稍缢缩，顶钝，每细胞冇1或2油球，6〜lumX3〜4um⑷（图7）。图6分牛抱子器图7壳二抱子形态图经过切片显微观察后，选择新近发病的病叶作为分离材料，并在病、健交接处选材取样进行病原分离，再纯化培养（图8），其性状基本符合壳二抱属的生长性状，显微镜检，比对切片所获得的病原，参考书籍、文献等相关资料，最终确定千日红斑点病的病原。图8纯化培养的菌落2.3发病率与病情指数根据对角线取样原则抽取10株，具体数据记录如下（表1）,并用

8、柱形图表形象表示各级病害比率（图9）:发病率（％）=（446-174）xl00%/446=60.99%病情指数二（174x0+120x1