实验三家兔Hb、RBC脆性测定及影响

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1、实验三1、血红蛋白的测定(比色法)2、红细胞脆性的测定3、影响血液凝固的因素1血红蛋白的测定（P80）1目的掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法。2实验原理血红蛋白的量与血液颜色呈正相关23主要材料家兔、沙里氏血红蛋白计、0.1N盐酸4方法与步骤4.1清洗：血红蛋白吸管、比色管；4.2将0.1N盐酸加入比色管中至刻度“2”处；4.3加样：用血红蛋白吸管取血20μL，加入盐酸中，并利用上层盐酸将吸管内壁洗涤2-3次（避免起泡）；4.4酸化10min以上；4.5比色；4.6读数：绝对数：每100mL血液中血红蛋白的克数；相对数：35注意事项5.1血红蛋白吸管和比色管要清洁；

2、5.2取血要准确；5.3避免比色管内起泡；5.4蒸馏水要逐滴加入，防止过量；5.5酸化时间不能少于10min；5.6在自然光下比色，比色无刻度一方朝外。4红细胞脆性的测定（P82）1目的学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解溶液渗透压在维持细胞正常形态中的作用。2原理红细胞膜对低渗溶液的抵抗力，称为RBC渗透脆性。用低渗NaCL溶液的浓度表示：最小抵抗、最大抵抗53实验动物：家兔4方法与步骤4.1溶液配置表2不同浓度NaCl溶液配制管号123456789101%NaCl（mL）9.06.56.05.55.04.54.03.53.02.5蒸馏水(mL)1.03.54.04.5

3、5.05.56.06.57.07.5NaCl浓度（%）0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.2564.2制备抗凝血：柠檬酸钠抗凝血。4.3加抗凝血：每只试管加1滴，轻轻混匀。4.4静置1h4.5观察结果4.5.1未溶血试管：出现分层现象，下层红色浑浊，上层为无色透明。4.5.2不完全溶血试管：出现分层现象，下层红色浑浊，上层为淡红色透明。4.5.3完全溶血试管：无分层现象，完全淡红色透明。76注意事项6.1试管要洁净、干燥；6.2配液要准确；6.3加血量要一致，1D；6.4轻轻倾倒试管2-3次混匀，避免机械溶血；6.5静置时间保证1

4、h，防止中途人为振动；6.6在光线明亮处观察结果。8影响血液凝固的因素（P88）1目的以凝血时间为指标，了解影响凝血的因素。2原理血凝是一个酶促过程，有多种凝血因子参与，分为内源性和外源性凝血两个途径。93动物：家兔4方法与步骤4.1家兔的麻醉、保定与手术33%乙醇溶液，6mL/kg，耳缘静脉注射。4.2试管准备4.3颈动脉采血4.4记录凝血时间105实验结果表1血液凝固及其影响因素试管号实验处理凝血时间（秒）1对照（空白）2液体石蜡4滴3棉花少许4冰水环境50.1%肝素4滴62%草酸钾4滴7肺组织浸液4滴5号管加3%CaCl24滴6号管加3%CaCl24滴116注意事

5、项6.1采血过程要尽量快，以减少计时误差；6.2每支试管口径大小及采血量要相对一致；6.3液体石蜡管内多余石蜡应尽量弃除；6.4判断凝血的标准要一致，一般以倾斜试管达30-45°时试管内血液不见流动为准。12表1不同浓度NaCl溶液配制管号123456789101%NaCl（mL）9.06.56.05.55.04.54.03.53.02.5蒸馏水(mL)1.03.54.04.55.05.56.06.57.07.5NaCl浓度（%）0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.25试管号实验处理凝血时间（秒）1对照（空白）2液体石蜡4滴3棉花

6、少许4冰水环境50.1%肝素4滴62%草酸钾4滴7肺组织浸液4滴5号管加3%CaCl24滴6号管加3%CaCl24滴表2:血液凝固及其影响因素13实验报告撰写格式有要求14家兔Hb、RBC脆性测定及影响血凝因素的观察1实验相关信息及目的2材料2.1动物2.2主要药品：2.3主要仪器：3实验方法：简述或按生理实验指导书a～b页介绍方法进行[1]4结果4.1家兔Hb、RBC脆性测定：见表1。分组实验组对照组Hb（g/L）RBC脆性（NaCL%）最小抵抗最大抵抗80-1500.6～0.550.4～0.35表1:家兔Hb、RBC脆性测定4.2家兔血凝时间的测定：见表2。表2：不

7、同因素对家兔血凝时间的影响5讨论5.1家兔Hb测定结果与对照比较，其值?，原因：5.2家兔RBC脆性测定结果与对照比较，其值?，原因：5.3家兔血凝时间测定结果表明，时间长短，原因：参考文献1.陈杰,家畜生理学[M],第四版,北京:中国家业出版社,23-34血凝时间（S）实验管号处理因素草+Ca++肝素+Ca++对照棉花肝素冰水石蜡草肺组织2.王力，论文题目[J]，中国兽医杂志，2006（9）：12-2315