实验二家兔Hb、RBC脆性测定及影响

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1、实验三影响血液凝固的因素红细胞脆性的测定血红蛋白的测定影响血液凝固的因素1实验目的以凝血时间为指标,了解影响凝血的因素,加深对生理止血过程的理解。2实验原理血液凝固是一个酶解激活过程,有多种凝血因子参与。根据凝血过程起动时凝血因子来源不同,可将凝血分为内源性激活途径和外源性激活途径。3实验动物:家兔4方法与步骤4.1家兔的麻醉、保定与手术33%乙醇溶液,6mL/kg,耳缘静脉注射。4.2颈动脉采血4.3试管准备4.4记录凝血时间5实验结果表1血液凝固及其影响因素试管号实验处理凝血时间(秒)1对照(空白)2液体石蜡4滴3棉花少许4冰水环境5肝素4滴6草酸钾4滴7肺组织浸液4滴5号管加CaCl24

2、滴6号管加CaCl24滴6注意事项6.1采血过程要尽量快,以减少计时误差,对比实验的采血时间要紧接着进行。6.2每支试管口径大小及采血量要相对一致,不可相差太大。6.3判断凝血的标准要一致,一般以倾斜试管达45°时试管内血液不见流动为准。红细胞脆性的测定(P82)1实验目的学习测定红细胞渗透脆性的方法,理解细胞外液渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重要性。2实验原理红细胞膜对低渗溶液有一定的抵抗力,这一特征称为红细胞的渗透脆性。3实验动物:家兔4方法与步骤4.1溶液配置表2不同浓度NaCl溶液配制管号123456789101%NaCl(mL)9.06.56.05.55.04.54.03.53.

3、02.5蒸馏水(mL)1.03.54.04.55.05.56.06.57.07.5NaCl浓度(%)0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.254.2制备抗凝血:柠檬酸钠抗凝血。4.3加抗凝血:每只试管加1滴,轻轻混匀。4.4静置1h4.5观察结果①未溶血试管:液体下层有大量红细胞下沉,上层为无色透明,表明无红细胞破裂。②不完全溶血试管:液体下层有红细胞下沉,上层出现透明淡红色,表明部分红细胞已经破裂,称为不完全溶血。②完全溶血试管:液体完全变成透明红色,管底无红细胞下沉。6注意事项6.1试管要洁净、干燥;6.2配液要准确;6.3加血量要一致,1D;6.4轻

4、轻混匀,避免机械溶血;6.5静置时间保证1h。血红蛋白的测定1实验目的掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法。2实验原理血红蛋白的量与血液颜色呈正相关3实验动物:家兔4方法与步骤:使用沙里氏血红蛋白计测定。①血红蛋白吸管清洁:自来水→蒸馏水→无水乙醇。②将0.1N盐酸加入测定管中至刻度“2”处。③用血红蛋白吸管取血20μL,将血液吹入盐酸中,并利用上层盐酸将吸管反复洗涤多次(避免起泡)。④酸化10min后,比色;⑤读数即为每100mL血液中血红蛋白的克数。5注意事项(1)血红蛋白吸管和比色管要清洁;(2)吸取血液要准确,避免起泡;(3)滴加蒸馏水要准确;(4)酸化时间不能少于10min;(5)在

5、自然光下比色。实验报告撰写格式有要求家兔Hb、RBC脆性测定及影响血凝的因素观察1实验相关信息及目的2材料2.1动物2.2主要药品:2.3主要仪器:3实验方法:简述或按生理实验指导书a~b页介绍方法进行[1]4结果4.1家兔Hb、RBC脆性测定:见表1。分组实验组对照组Hb(g/L)RBC脆性(NaCL%)最小抵抗最大抵抗80-1500.6~0.550.4~0.35表1:家兔Hb、RBC脆性测定4.2家兔血凝时间的测定:见表2。表2:不同因素对家兔血凝时间的影响5讨论5.1家兔Hb测定结果与对照比较,其值偏高,原因:5.2家兔RBC脆性测定结果与对照比较,其值,原因:5.3家兔血凝时间测定结果

6、表明,时间长短,原因:参考文献1.陈杰,家畜生理学[M],第四版,北京:中国家业出版社,23-34血凝时间(S)实验管号处理因素草+Ca++肝素+Ca++对照棉花肝素冰水石蜡草肺组织2.王力,论文题目[J],中国兽医杂志,2006(9):12-23

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