斐林试剂用法再探究

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1、斐林试剂用法再探究摘要：对于还原糖的检测和观察这个实验，书上介绍了斐林试剂的使用方法，执笔者对于该方法的单一性产生怀疑，根据科学探究的一般方法，探究斐林试剂的甲液、乙液的加入顺序；水浴的温度；双缩服试剂是否能取代斐林试剂三个问题逐一验证。关键词：还原糖；斐林试剂；实验探究中图分类号：G632.41文献标志码：A文章编号：1674-9324（2013）21-0226-02一、提出问题在还原糖的检测和观察这个实验屮，人教版高一生物必修一第18页对检测还原糖的试剂-斐林试剂进行以下说明：①斐林试剂的甲乙液等量混合均匀

2、后再注入；②将试管放入盛有50〜65°C温水的大烧杯中加热约2分钟⑴。在做预实验时，争对这两点产生了几个疑问：①斐林试剂是否一定要混合后才能使用？②斐林试剂是否必须在50〜65°C这个温度范围内才能作用，低于这个温度可不可以？沸水可不可以？③斐林试剂（甲液：0.lg/L的NaOH溶液，乙液:0.05g/mL的CuS04溶液）和双缩腺试剂（A液0.lg/L的NaOH溶液,B液:0.Olg/mL的CuS04溶液）的两种成分相同，只是CuS04的浓度不同，双缩腺试剂是否也能检测还原糖?二、作出假设根据以上疑问，笔者作

3、出假设：①斐林试剂一定要混合后才能使用；②斐林试剂不一定必须在50〜65°C这个温度范围内才能作用；③双缩月尿试剂也能在一定程度上检测还原糖。三、制定、实施计划（-）实验材料、仪器和试剂1•选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织，以苹果、梨为最好（本实验选择梨作为实验材料）。2•仪器、试剂。（1）仪器：解剖刀，试管，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，研钵，石英砂，纱布。（2）试剂：①斐林试剂（甲液：0.lg/L的NaOII溶液，乙液:0.05g/mL的CuS0

4、4溶液）;②双缩腺试剂（A液0.lg/L的NaOH溶液,B液:0.Olg/mL的CuS04溶液）。（二）设计实验1•以下各组实验中，所用到的斐林试剂都是按照甲液0.5mL,乙液0.5mL的比例。2•设计3组实验并实施。对照实验：取一支试管标为①加入2讥梨组织样液，加入ImL新鲜配制的斐林试剂（甲液0.5mL,乙液0.5mL混合均匀）。第一组：取三支试管标为②③④分别加入2讥梨组织样液，②号试管先加甲液0.5mL摇匀后加乙液0.5mL；③号试管先加乙液0.5mL摇匀后加甲液0.5mL；④试管同时加入甲液0.5讥、

5、乙液0.5mL摇匀（甲液乙液不混合，分别加入试管，时间控制基本为同时）。同时放入50〜65°C水浴加热2min,观察颜色变化。第二组：取四支试管标为⑤⑥⑦⑧分别加入2mL梨组织样液和ImL新鲜配制的斐林试剂，分别进行水浴加热，⑤号试管放入冷水浴，慢慢加热至50〜65°C,⑥号试管先放入50〜65°C水浴然后继续加热，⑦号试管直接放入沸水浴，⑧号试管放入85°C的水浴。2分钟后观察颜色变化。第三组：取一支试管标为⑨加入2讥梨组织样液，加入双缩腺试剂A液ImL摇匀后，再加入B液4滴摇匀，放入50〜65°C水浴加热2

6、分钟，观察颜色变化。重复上述实验三次。四、观察实验结果得出结论第一组实验结果：题注：A图为第一组实验，三支试管依次为：对照实验，先甲后乙，先乙后甲。B图为第一组实验，两支试管依次为：对照实验，甲乙不混合同时加入。根据图片清晰可见，四支试管的颜色几乎一样，都为砖红色，凭肉眼根本无法区分［2］。因此第一个假设不成立，甲乙液混合与不混合差别不是很人，在实验过程中甲液、乙液的加入顺序无严格要求［3］。第二组实验结果：题注：C图为第二组实验，该试管直接放入冷水浴，慢慢加热至50〜65°CoD图为第二组实验，该试管先放入5

7、0〜65°C水浴然后继续加热。E图为第二组实验，三支试管依次为：沸水浴，85°C水浴，对照组。从图片C、D、E观察可得：⑤号试管的颜色与对照组相比颜色较浅，⑥号试管与对照组接近，⑧号试管的颜色与对照组相比颜色较深，⑦号试管的颜色明显已非砖红色，为棕褐色偏向黑色［4］。笫二个假设的正确性仍有待验证，水温过高时颜色并非砖红色，而水温低时也能变为砖红色只是颜色较浅。第三组实验结果：题注：F图为第三组实验，两支试管依次为：双缩腺试剂，对照实验。从图中看出双缩月尿试剂鉴定还原糖时也能呈现颜色变化，变为橘黄色，较砖红色颜色

8、有点浅。所以假设三也成立。但这不是意味着两种溶液可以混用。从两者的作用原理出发，两种溶液还是不能混用［5］,斐林试剂的作用机理是甲液乙液混合后生成淡蓝色的Cu(0H)2沉淀，然后与还原糖在加热作用下生成Cu20砖红色沉淀。而双缩月尿试剂是用来鉴定蛋白质的，蛋白质在碱性溶液中与铜离子(Cu2+)作用形成紫色络合物。参考文献：［1］分子与细胞［M］・北京：人民教育出版社.［2］苏宏鑫•斐林