斐林试剂热滴定定糖法

《斐林试剂热滴定定糖法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、山东大学实验报告费林试剂热滴定定糖法xx生科四班201100140120同组者：xx【实验目的】1.初步掌握费林试剂热滴定定糖法的原理和方法。2.正确掌握滴定管的使用方法和热滴定的终点。【实验原理】1.还原糖还原糖（reducingsugar）：羰基碳（异头碳）没有参与形成糖苷键能够还原斐林(H.vonFehling)试剂或托伦斯(B.Tollens)试剂(银氨溶液)的糖称为还原糖，所有的单糖（除二羟丙酮和五碳糖，即核糖和脱氧核糖），不论醛糖、酮糖都是还原糖。大部分双糖也是还原糖，蔗糖例外。斐林试剂

2、是含Cu2+络合物的溶液，被还原后得到砖红色Cu2O的沉淀。托伦斯试剂被还原后（银镜反应）能生成单质银，在试管壁上可看到“银镜”。分子结构中含有还原性基团（如游离醛基`半缩醛羟基或游离羰基）的糖，叫还原糖，如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。一般情况下，单糖的还原能力主要来自它的醛基，如葡萄糖，而多糖则大多因为半缩醛羟基的存在。还原后，自己会变成糖酸。如葡萄糖就会变成葡萄糖酸。2.费林试剂费林试剂由氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05g/mL的溶液，还有酒石酸钾钠配制而成的

3、。它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。因此，斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。3.实验方法5山东大学实验报告本实验采用费林试剂热滴定法，费林试剂是氧化剂，由甲、乙两种溶液组成。甲液含硫酸铜和次甲基蓝(氧化还原指示剂)；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。当甲、乙两溶液混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。在碱性溶液中，酒石酸钾钠与沉淀的氢氧化铜作用形成可溶性的络合物。【实验仪器】1.移液管(5、10毫升)2.100

4、毫升容量瓶3.水浴锅4.铁架台5.胶头滴管【实验材料】1.面粉2.酚酞试剂3.菲林试剂（甲、乙液）4.10%氢氧化钠5.标准葡萄糖（1mg/ml）6.6MHCl7.烧杯8.玻璃棒9.碱式滴定管10.电炉11.分析天平【实验操作】1.总糖的提取准确称取面粉1克，加入6mol/L盐酸10毫升，蒸馏水15毫升，混匀。沸水浴加热半小时后，取出几滴水解液用碘化钾-碘溶液检查水解是否完全，若已经水解完全，则不呈现蓝色。冷却后用10%氢氧化钠中和至中性溶液，定容至100毫升。准确吸取该溶液10ml，移入100ml

5、容量瓶内并定容至刻度，即为测定总糖的样品液。2.空白测定5山东大学实验报告准确吸取费林甲、乙液各5ml和蒸馏水5ml放入100毫升的锥形瓶中，再用滴定管加入6ml的标准葡萄糖液，混匀后加热，沸腾后，记录下滴定管的起始刻度，每滴1-2秒的速度由滴定管滴入标准葡萄糖液直至蓝色变成黄色且在30s内颜色又变成深红色为止。记录滴定完后滴定管的刻度，并同时记录滴定所需时间。平行测定三次，直至所得的平均数与各组的差值＜0.05ml。3.总糖的测定准确吸取样品液5ml放于100ml锥形瓶内，加入费林甲液、乙液各5m

6、l，为使测定的时间与空白测定的时间基本一致，向锥形瓶内加入3ml的标准葡萄糖液，然后按测定空白同样操作进行滴定（控制流速，使滴定时间与空白滴定的时间基本一致），记下耗用标准葡萄糖的毫升数。平行测定三次，直至所得的平均数与各组的差值＜0.05ml。2、3步中所加试剂如下表：空白滴定样品滴定次数123平均123平均费林甲/ml555/555/费林乙/ml555/555/蒸馏水/ml555/////样液/ml////555/预加葡萄糖/ml888/444/消耗葡萄糖/ml1.751.501.451.571

7、.251.301.151.235山东大学实验报告【计算】样品m=1.0025gV1=9.57V2=5.23还原糖(或总糖)%==86.58%【分析讨论】1.原理分析本实验采用费林试剂热滴定法，费林试剂由甲、乙两种溶液组成。甲液含硫酸铜和次甲基蓝(氧化还原指示剂)；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。当甲、乙两溶液混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。在碱性溶液中，酒石酸钾钠与沉淀的氢氧化铜作用形成可溶性的络合物。热滴定中滴入标准葡萄糖液直至蓝色变成黄色且在30s内颜色又变成深红色

8、为止，记录下数据处理即可得面粉中的糖含量。2.步骤分析1)为使空白测定与样品测定的时间一致，在样品滴定之前应提前加入一定量的葡萄糖；2)在滴定过程中，应注意在颜色由蓝色变为紫色时，应减慢滴速，当颜色变为土黄色时，立即停止加入葡萄糖，颜色会再度变回紫色时，不应再滴加葡萄糖；3)在水解面粉时应确保面粉完全水解，即加入碘液后不再出现特殊的蓝色，此外，水解液应中和为中性。3.误差分析本实验至少有以下几种原因可能导致实验误差的出现：1)实验过程中容量瓶定容后，没有摇匀，导致局部