检测梅毒的四种方法及其临床意义

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1、检测梅毒的四种方法及英临床意义[摘耍]冃的:探讨梅毒的四种检测方法及其临床价值,建立适合口己实验室的梅毒检测流程和报告系统。方法:收集梅毒患者血标木100例,分别采用酶联免疫吸附测定法(EL1SA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、胶体金快速检测试验(ACONSYP)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测血清梅毒。结果:先进行TP-ELISA初筛检测的100例梅毒患者血清中,四种方法均为阳性者94例,其中TPPA阳性98例,TRUST阳性94例,SYP阳性96例。而在120例非梅毒对照组中,经TP-EL1SA检测阴性例数为114例

2、,特异性为95%。结论:四种方法均存在一定的假阴性和假阳性,为了提高梅毒检出率,对于TP-ELISA阳性标本,要做TRUST和TPPA复检。[关键词]梅毒;EIJSA;TRUST;ACONSYP;TPPA[中图分类号]R759.1[文献标识码]B[文章编号11673-7210(2008)09(b)-155-02梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种传染病,人体一旦被感染上梅毒螺旋体后,其血清中就会产生特异性抗螺旋体抗体和非特异性抗类脂质抗体(又称反应素)。现临床上常用诊断梅毒的实验索方法主要有:腮联免疫吸附试验(EIJSA)、甲苯胺红不加热血清试验(T

3、RUST)、胶体金快速检测试验(AC0MYP)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋休血凝试验(TPHA)、蛋片印迹实验(WB)等,但如何选择或联合以上检测方法,不同的实验室不尽和同。为了尽早发现和确诊梅毒,各实验室应建立一套适合自己的完整的、统一的梅薄实验室报告系统。及吋为临床提供准确的检验结果,使Z能釆取相应治疗措施和有效控制病情发展。为此,我们收集了100例梅毒患者血清标本,分别采用四种检测方法,并対结果进行比较分析,现报道如下:1资料与方法1.1研究对象100例均为2007年1月〜2008年6月来我院就诊和住院梅毒患者,经

4、TP-ELISA检测血清标木均为阳性,其中男62例,女38例,年龄21〜86岁,平均53岁为实验组。120例非梅毒对照组,其中肝病患者15例,孕产妇25例,冠心病20例,肾移植患者32例,正常体检者28例,其中男68例,女52例,年龄19〜83岁,平均51岁。实验组和对照组选择依据中华人民共和国卫生部行业标准《梅毒诊断标准及处理原则》。1.2方法抽取梅毒患者肘静脉血3ml,分离血清后及时检测,対于用TP-EIJSA检测为阳性的血清标本,再分别采用TRUST、ACONSYP(SYP)、TPPA三种方法检测。试剂均在有效使用期内,严格按试剂说明书

5、操作。1.3试剂和仪器TP-ELTSA试剂由上海科华有限公司提供,TRUST试剂由上海荣盛生物技术冇限公司提供‘ACONSYP试剂山艾康生物技术有限公司提供,TPPA试剂则由Fl本富士珠式会社提供。仪器为奥地利产Biocell-2010酶标仪和Fluido全口动洗板机。2结果首先对梅毒患者血清标本进行TP-EL1SA初筛测定,结果为阳性的分别同时进行TRUST、SYP、TPPA测定,结果见表lo表1梅毒患者血清标本四种检测结果5二100)在100例梅毒患者血清中,四种方法均为阳性者94例,其中TPPA阳性98例,TRUST阳性94例,SYP阳

6、性96例。TRUST敏感性略低于TPPA,TP-ELTSA和SYP。120例非梅毒对照组中,经TP-ELISA检测阴性例数为114例,特异性为95%。3讨论据文献报道[1],人体感染梅毒螺旋体后血清屮产生的抗螺旋体抗体比抗类脂质抗体出现早。且特异性抗体出现早、消失迟,即使经过止规抗梅毒治疗,仍可检测出其特异性抗体,甚至可终生检出。ELISA釆用双抗原夹心法,即在聚乙烯微孔条上预标记基因表达梅毒抗原,用辣根过氧化物酶(HRP)标记基因重组梅毒抗原,检测血清中TP-TgG抗体和早期的IgM抗休。该法利用抗原的不同特性,联合使用可得到更高的敏感性和

7、特异性[2,3]。TP-EL1SA有结果客观准确,操作简便,试剂成木低等优点,可作为早期梅毒诊断的方法,尤其适用于二期梅毒的诊断。但TP-ELISA木身也存在问题,如标木中一些类过氧化物酶样物质的增高,血浆蛋白紊乱等,会造成假阳性[4]。而当标本梅毒螺旋体抗体滴度低于试剂检测限时,又可出现假阴性。从上述结果中町看到,对于对照组的检测,120例中岀现6例假阳性。SYP采用纯化重纽基因的梅毒抗原,以胶体金作为指示标记于硝酸纤维索膜上进行反应,以双抗原夹心法原理快速定性检测梅毒螺旋体抗体,灵敏度也较高,见表K但血清/浆中浓度过低吋,SYP会产生假阴

8、性反应。SYP成本低,操作简便,结果明了快速,但不适于批虽检TPPA为梅毒确证试验,其特异性和敏感性相当高[3],但操作较复杂,对操作人员水平要求也较高。启资料表明

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