实验一 抗体制备和凝集反应Ⅰ.ppt

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时间:2020-01-17

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1、免疫学实验总分:100分实验报告:20%(原理、方法、结果、结果分析)考勤:5%考试:35%实验设计:40%隔离衣卫生概述体液免疫功能检测抗体制备和检测未知抗原或抗体的体外检测细胞免疫功能检测PBMC的分离、扩增非特异性免疫功能检测巨噬细胞吞噬功能检测免疫病理超敏反应实验一 抗体的制备和凝集反应(1)Test1抗体的制备——初次免疫1.原理:异种型抗原:抗体产生规律:SRBCmouse抗原动物血清(含抗体)皮下注射,3次2.方法:脱纤维绵羊红细胞(SRBC)加入3ml生理盐水,混匀2000rpm,离心,5min弃上清制备绵羊红细胞溶液

2、20%、25%、30%、40%取0.1ml皮下注射免疫小鼠加入3ml生理盐水,混匀2000rpm,离心,5min弃上清Test2凝集反应Ⅰ抗原抗体反应的特征“LockandKey”模式:高度特异性非共价键结合氢键、静电引力、范德华力、疏水键可逆性结合亲和力;亲合力抗原抗体比例Ⅱ影响抗原抗体反应的因素抗原抗体比例亲和力;亲合力抗原抗体比例抗原的理化性质温度:37℃~56℃凝集反应:颗粒性抗原沉淀反应:可溶性抗原Ⅱ影响抗原抗体反应的因素温度亲和力;亲合力抗原抗体比例抗原的理化性质温度:37℃~56℃PH值:6~8离子浓度:0.9%NaCl

3、Ⅱ影响抗原抗体反应的因素凝集反应沉淀反应补体结合反应中和反应Ⅲ经典抗原抗体反应定义:Ⅳ凝集反应分类:直接凝集反应:玻片凝集试管凝集间接凝集反应可见的凝集团块颗粒性抗原相应抗体+可见的凝集团块颗粒性抗原相应抗体+直接凝集反应可溶性抗原致敏颗粒相应抗体+可见的凝集团块间接凝集反应原理:ABO血型:玻片凝集反应:材料:抗A、B血清玻片采血针木签ABO血型检测+抗A血清or抗B血清?方法:a.玻片AB抗A血清抗B血清b.采血消毒手指采血针刺破手指滴一滴血至玻片上c.反应以木签将血清和血滴混匀d.观察结果预期结果血型ABABO注意事项彻底分离两

4、种血清消毒木签两侧不可混用及时观察结果将血液污染品放置在特定容器1组:左1;20%2组:左2;20%3组:左3;20%4组:右1;20%5组:右2;25%6组:右3;25%7组:左1右1;25%8组:左1右2;25%9组:左1右3;30%10组:左2右1;30%11组:左2右1;30%12组:左3右1;30%13组:左2右2;40%14组:左2右3;40%15组:左3右2;40%16组:左3右3;40%取0.1ml皮下注射

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