硫代巴比妥酸法测定鱼体肌肉中脂质过氧化物含量的方法优化 优先出版.pdf

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1、安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2017，45(10):91－92DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2017.10.029硫代巴比妥酸法测定鱼体肌肉中脂质过氧化物含量的方法优化*祁红学，刘秀萍，安静(晋中学院化学化工学院，山西晋中030619)摘要［目的］优化鱼体肌肉组织中脂质过氧化物(LPO)含量的测定条件。［方法］使用硫代巴比妥酸分光光度法测定LPO含量，设计乙酸用量、十二烷基磺酸钠(SDS)用量、处理时间和温度4因素3水平的正交试验，考察

2、各因素水平组合对鱼体肌肉中LPO含量测定的影响，优化测定条件。［结果］各因素对LPO含量测定结果的影响由大到小依次为SDS用量、乙酸用量、温度、处理时间;通过直观分析和方差分析，得出最优组合为A3B1C3D2，即测定的最优组合为20%的乙酸，65℃水浴中保持60min。［结论］该研究可为鱼类氧化应激损伤研究提供方法支持。关键词脂质过氧化;分光光度法;正交试验中图分类号TS207．3文献标识码A文章编号0517－6611(2017)10－0091－02ImprovementofThiobarbitu

3、ricAcidＲeactionfortheDerterminationofLipidPeroxidationintheMusclesofFish*QIHong-xue，LIUXiu-ping，ANJing(CollegeofChemistryandChemicalEngineering，JinzhongUniversity，Jinzhong，Shanxi030619)Abstract［Objective］Toimprovetheoptimumconditionformeasuringthelipi

4、dperoxidation(LPO)inthemusclesoffish．［Method］TheLPOwasdeterminedusingspectrophotometerwiththiobarbituricacid．Theorthogonaldesignwithfourfactorsandthreelevelswasconductedtoevalu-atethelevelofLPOinthecyprinoidfish．Fourfactorswereincludedthegradientoface

5、ticacid，sodiumdodecylsulfate，timeandtemperature，re-spectively．［Ｒesult］TheweightsequencewasknownasSDS，thegradientofaceticacid，temperature，timebycomparingthedifferenceofeachfactor．TheresultsindicatedthattheoptimumgroupwasABCDbyvisualanalysisandvariancea

6、nalys，namely20%aceticacid，65℃water3132bath，60min．［Conclusion］Thestudycansupporttheresearchonthedemageofoxidativestressinfish．KeywordsLipidperoxidation;Spectrophotometry;Orthogonaltest细胞在发生氧化应激反应时，会发生脂质过氧化，该反1材料与方法应是发生于不饱和脂肪酸(UFA)共价键上的一系列自由基1．1材料反应。机体内

7、由于有很多UFA，因此极易受到氧化作用损1．1．1原料及主要试剂。硫代巴比妥酸，分析纯，北京化工［1］伤，产生有细胞毒性的脂质过氧化物(LPO)。厂;0．9%NaCl溶液，上海金穗生物科技有限公司;乙酸，分析目前，对脂质过氧化的研究领域涵盖了肿瘤、感染、衰纯，北京化工厂;鲤鱼，太原市万柏林区市场;SDS，分析纯，北［2－3］老、心血管疾病、毒理学等方面。测定脂质过氧化的方京红星化工科技公司。［4］法有荧光和分光光度法，由于分光光度法操作简单、快速，1．1．2主要仪器设备。数显恒温水浴锅(HH－6)

8、，常州智仍在大量使用，其中硫代巴比妥酸(TBAＲS)法是最为常用的博瑞仪器制造有限公司;电子天平(WT3003)，上海西艾爱电［5］方法。一些脂肪酸，尤其是不饱和脂肪酸，氧化后逐渐分子有限公司;水浴氮吹仪(SHD－003)，上海极恒实业有限公解为一系列复杂的化合物(如醛和酮类化合物)，称之为司;电动离心机(YXJ－1)，江苏省金坛市荣华仪器制造有限TBAＲS反应物。通过检测TBAＲS反应物的含量来反映LPO公司;可见分光光度计(V－1200)，上海美谱达仪器有限［6］的水平，从而表