探究不同光对叶绿体活性的影响.doc

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探究不同光对叶绿体活性的影响向亚建，冯涓，张海燕（华东师范大学生命科学学院09级）摘要：叶绿体里含有的光和色索有多种，随着各种色索的含量比的不同，植物对不同光波的吸收程度也不同，影响光反应的活性。本组为探究日光，红光，蓝光，绿光对青菜的叶绿体活性影响，利用希尔反应测定叶绿体的活性。发现不同红蓝光更适合叶绿体进行光合作用,绿光作用缓慢。关键词：青菜，叶绿体，光，希尔反应1•引言叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，其中叶绿素是吸收光的物质，不同的光合色素对光的吸收峰值不同。通过本实验，可以了解到青菜大棚培育如何使用合适的照明增高其产量。2.材料与方法2.1供试材料与试剂河西食堂所买青菜石英砂、冰块捉取介质：0・5mol/L蔗糖、10mmol/LNacl?PH7.010mmol/L2,6-DCIP溶液2.2实验仪器 研钵、漏斗、纱布、离心机、离心管、天平、分光光度计、TypAcpha250>冰盒2.2方法2.2.1提取叶绿体将青菜的叶片称取10匕加入20ml预冷的提取介质和少许石英砂研磨,过滤。先用800rpm离心3min,取上清在室温下2000rpm离心8min,所得沉淀为叶绿体。然后将叶绿体沉淀按1:12进行稀释。（整个过程在冰浴的条件下进行）2.2.2在不同颜色光照下希尔反应的活性测定将稀释后的叶绿体悬液分别加入编号为2、3、4、5、6、7、8的比色杯，加入一滴乙6■二氯靛酚迅速摇匀。一号管为空白对照，加入提取介质和乙6■二氯靛酚一滴调零•在620nm处测2、3、4、5、6、7、8的起始OD值。2照日光，3、4照蓝光，5、6照绿光，7、8照红光。每隔一分钟快速测定OD值。（测前需要摇匀）3•结果以OD值为纵座标，时间（min）为横坐标 图2 +蓝光—FI光—蓝光—绿光红光由以图1、图2、图3可知:红蓝光照时，叶绿体希尔反应0D值从光照开始就变化较大，变化较快。而LI光变化较均匀，作用没有蓝绿光明显。绿光0D值图线变化缓慢，整体平缓。由图4可知在四种光照下，红光的作用最明显，日光次之，而绿光的趋势虽有变化，但作用不明显。4•分析 己知叶绿素最强的吸收区有两处：波长640~660nm的红光部分和430~450nm的蓝紫光部分。叶绿索对橙光、黄光吸收较少，尤以对绿光的吸收最少。而在以上结果中，证明了叶绿体吸收红蓝光的程度比绿光强，符合以上规律。但由于实验误差，在图4中有儿个点不符合趋势，又突然增加的趋势。但在其0D值随时间的变化图1、2、3中可知其活性是逐渐降低的。但就绿光而言，希尔反应活性变化因该是不明显的，但就图2而言，绿光的希尔反应活性人随着时间变化而变化。探究去原因，因该是绿光不纯，导致其他光质引起光反应，而使其0D值发生变化。就整个实验，叶绿体对红光的吸收大于蓝光大于日光大于绿光。参考文献：《细胞实验讲义》 探究实验自评本次探究实验我们选的课题是探究叶绿体的最适光波长。已经很久了吧，在生物书上看到叶绿体含有叶绿素a、b,类胡萝卜素（叶黄素、胡萝卜素），知道每种色素都有其的最适波长。一直都很想知道这个最适波长到底是多少，不同颜色的光对植物的生长会造成什么影响。所以我们一致选择而这个课题。做本次试验其实一开始就有些问题的。首先是借实验器材的问题，我们到物理实验楼才发现我们不知道负责老师是谁，在哪里。所以通过练习物理系的同学，拿到了景老师的号码，找景老师借到了仪器。开始我们决定的是7种光都进行实验，但是仪器只有5种光，而且其中两种光很小，不易做实验。所以我们最终选择了红，蓝，绿三种光,加上日光。第一次预实验时，由于稀释倍数不得当，所测得的0D值都小于1,而且由于准备不充分，叶绿体放置时间过长，使其反应活性不强，0D值变化较小。而且加入2,6-DCIP后颜色不对，所以停止实验重做。第二次试验我们总结了上次实验，将后面要做的步骤，任务安排分配好后再开始。我们按照实验讲义的步骤稀释了十二倍，然后测0D值在1左右，然后再开始做实验，而且整个过程很快，得出了满意的实验结果。实验不只是一个人的事儿，是大家一起合作所完成的。相互配合才是做好实验的基础。同时，不打无准备之仗，认真筹划每一个步骤，找出先前的错误，做一次完善一次，才能把实验做好。