生物化学实验预习及实验报告范例.doc

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1、目录预习报告示范2实验还原糖和总糖的测定2实验二：(Fehling试剂)直接(热)滴定定糖法2实验报告示范15实验还原糖和总糖的测定15实验二：(Fehling试剂)直接(热)滴定定糖法15一、实验原理15二、实验用品15三、实验操作步骤16四、实验记录及计算结果17五、结果与讨论17预习报告示范实验还原糖和总糖的测定实验二：(Fehling试剂)直接(热)滴定定糖法一、实验目的和要求1．初步掌握费林试剂热滴定定糖法的原理和方法。2．正确掌握滴定管的使用方法和热滴定终点的判断方法。二、实验原理思考(一)基本原

2、理还原糖是指含有自由醛基(如葡萄糖)或酮基(如果糖)的单糖和某些二糖(如乳糖、麦芽糖)。在碱性溶液中，还原糖能将金属离子(Cu2+、Hg2+、Ag+等)还原，而还原糖本身则被氧化成各种羟酸类化合物。该特性常用于还原糖的定性和定量测定。(二)本实验反应原理1、Fehling试剂（又称作酒石酸铜溶液）介绍：A液：由硫酸铜和次甲基蓝组成1、硫酸铜的作用是什么？1、Cu2+用于将来被还原成Cu+2、次甲基蓝的作用是什么？2、氧化还原指示剂B液：由氢氧化钠、酒石酸钾钠和亚铁氰化钾组成3、氢氧化钠的作用是什么？3、一、生

3、成Cu(OH)2↓，二、创造碱性反应环境4、酒石酸钾钠的作用是什么？4、用以生成可溶性络合物酒石酸钠铜5、亚铁氰化钾的作用是什么？5、生成可溶性复盐，以便于观察滴定终点用前将A、B两液等体积混合时，依次反应：(1)2NaOH+CuSO4=Cu(OH)2↓（天蓝色）+Na2SO4(2)在碱性溶液中：酒石酸钠铜为可溶性络合物。2、酒石酸铜与还原糖热滴定时的反应：(1)红色氧化亚铜沉淀生成：在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产生红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降

4、解(1)反应生成的氧化亚铜沉淀与斐林试剂中的亚铁氰化钾（黄血盐）反应生成可溶性复盐：6、为什么要生成可溶性复盐？6、便于观察滴定终点(2)亚甲基蓝为氧化-还原指示剂指示滴定终点7、为什么亚甲基蓝可为滴定终点指示剂？7、因为亚甲基蓝氧化能力比Cu2+弱，因此Cu2+会先被还原。当Cu2+被全部还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型的亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝，即指示到达滴定终点。(4)根据样液消耗量即可计算出还原糖的含量。三、实验用品思考答案用品量实际用量(一)、实验材料：红薯粉（可换淀粉）班级：16

5、g(二)、实验试剂：(1)Fehling试剂A液:用品：电子天平、计算：5×3×3×分别称取15gCuSO4·5H2O和0.05g亚甲基蓝于烧杯中；加50~100mL蒸馏水将它们溶解；转移到1000mL容量瓶中；定容到1000mL。8、为什么要分开配制A、B液？什么时候混合较佳？100/200mL烧杯1、玻棒、1000mL容量瓶、蒸馏水n，适当放大（一般多配1/3左右）配1000mLCuSO4·5H2O=(g)亚甲基蓝=(g)(1)Fehling试剂B液:先称取50g酒石酸钾钠和+75gNaOH，溶于水；再称

6、取4g亚铁氰化钾，溶解分别转移到1000mL容量瓶中；定容到1000mL。9、为什么贮存于具橡皮塞玻璃瓶中？用品：100/200mL烧杯2、1000mL容量瓶配1000mL酒石酸钾钠=(g)NaOH=(g)亚铁氰化钾=(g)(3)0.1%葡萄糖标准溶液：G在98~105℃下干燥至恒重为无水葡萄糖；准确称取1.000g无水葡萄糖，用少量蒸馏水溶解；转移到1000mL容量瓶中，加水约置750ml往容量瓶中加入5-8mL浓HCl；定容1000ml。10、G为什么在98~105℃下干燥？葡萄糖中的水分是吸湿水还是结晶

7、水？8、因为葡萄糖中的水分是吸湿水，在98~105℃下可以使之汽化除去，并且该温度不致使葡萄糖碳化。称量瓶或表面皿或培养皿1套烘箱，10mL移液管G=(g)浓盐酸=（mL）标准液葡萄糖浓度C=g/mL11、为什么加5-8mL浓HCl？可以防止微生物生长。(4)6mol/L盐酸溶液*：配100mL6mol/L盐酸：吸取258.00mL36%的发烟盐酸，定容到100mL。12、这样配出的盐酸是标准浓度吗？可用量筒量取吗？200mL容量瓶，10mL移液管配200mL(5)I-IK溶液因为是定性试剂。25/50ml滴

8、瓶×6配200mL分别称取5gI和10gIK于烧杯中，溶解，定容至100ml。可用容量瓶取蒸馏水，烧杯中溶解后即可分装。为什么？I=(g)IK=(g)(6)10%NaOH称取50gNaOH，溶于500ml蒸馏水中。冷却至室温。13、盛于什么容器中？用滴瓶分装，实验完成后该如何处理滴瓶？塑料试剂瓶500ml×1，50ml滴瓶×4配500mLNaOH=(g)(7)0.1%酚酞指示剂称取0.1g酚酞溶于1