检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质.ppt

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1、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理斐林试剂苏丹Ⅲ橘黄色红色砖红色沉淀紫色苏丹Ⅳ双缩脲试剂鉴定物质试剂实验现象还原性糖脂肪蛋白质淀粉碘蓝色必修1第18～19页生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验原理比较项目试剂及成分原理溶液浓度方法加热与否结果可溶还原糖的鉴定斐林试剂NaOH和CuSO4砖红色沉淀蛋白质的鉴定双缩脲试剂NaOH和CuSO4溶液呈紫色斐林试剂与双缩脲试剂的配制及使用新配制的Cu(OH)2溶液在碱性环境下的Cu2+NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.05g/mLNaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.01g/mL先把NaOH溶液和

2、CuSO4溶液等量混合，现用现配。先加入Na0H1mL，然后再加CuS044滴，摇匀。(不能过量)水浴加热不需要方法步骤：1．实验材料、仪器和试剂的选择2．设计记录表格，记录预测结果3．检测的方法步骤(1)还原糖的检测和观察;(2)脂肪的检测和观察;(3)蛋白质的检测和观察;实验的材料的选择和处理有什么要求？材料的选择材料的处理还原性糖的鉴定脂肪的鉴定含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果和梨富含脂肪的种子，如花生浸泡3~4小时/蛋白质的鉴定富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清黄豆需浸泡1-2天，鸡蛋清要先稀释淀粉的鉴定马铃薯/选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰)，

3、苹果、梨最好。实验流程(步骤)1.可溶性还原糖制备组织样液：制浆：去皮、切块、研磨，过滤：（用单层纱布）取液：（２mL）显色反应２mL组织样液刚配制的斐林试剂２mL现象：呈现蓝色变成砖红色(用前混匀)50～65.C水浴加热2min还原糖的检测和观察：还原糖的检测结果2.脂肪的鉴定取材：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片制片：①选取最薄的薄片移至载玻片中央②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液2－3滴，染色２－３min③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色(多余的苏丹Ⅲ)④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片

4、，后用高倍镜观察现象：有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒脂肪微粒脂肪的检测结果3.蛋白质的鉴定选材与制备组织样液：黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）［黄豆浸泡→去皮→切片→研磨→过滤→滤液］显色反应２mL组织样液双缩脲试剂Ａ　２mL现象：无色双缩脲试剂Ｂ３－４滴紫色或紫红色(创设碱性条件)(提供Cu2+)蛋白质的检测结果4.淀粉的鉴定取材：马铃薯匀浆检测：２mL组织样液碘液2滴现象：摇匀后变成蓝色各种可供实验的材料梨黄桃胡萝卜黄豆花生种子小麦种子①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是，理由是梨的组织细胞，你打算用什么试剂鉴定?。②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为，你打算用什

5、么试剂鉴定?.[例]做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：梨颜色为白色，并且糖含量较高斐林试剂脂肪含量不如花生高，也不容易做切片用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ试剂③小麦种子中糖类化合物含量很高，却不适合用来鉴定__________，这是因为________________________________________。④适合于鉴定蛋白质的是，理由是，鉴定所用的试剂是。蛋白质含量高黄豆和蛋清双缩脲试剂淀粉可溶性还原糖淀粉是非还原糖且不溶于水1、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中

6、最合理的是()A．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖B．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉C．苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖D．苹果转熟时单糖聚合成淀粉C例题２、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是()A.斐林试剂B.红墨水C.双缩脲试剂D.苏丹Ⅳ染液B例题3(2005.广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是()A、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A1.怎样配制斐

7、林试剂？用浓度为0.1g/mlNaOH(甲液)与等量的0.05g/mlCuSO4(乙液)混合均匀而成。NaOH+CuSO4Cu(OH)2蓝色沉淀+……Cu(OH)2+还原糖Cu2O砖红色沉淀+……问题思考2.为什么斐林试剂可检验还原糖的存在？斐林试剂的本质是Cu(OH)2的悬浊液，还原糖把Cu(OH)2还原成Cu2O沉淀。3.为什么要用新配制的试剂？因为斐林试剂稳定性较差，要现配现用。4.怎样使用双缩脲试剂？试比较斐林试剂和双缩脲试剂的异同。向试管内注入组织样液，先注