菊花组织培养(5).ppt

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1、课题一菊花的组织培养有丝分裂受精卵细胞分化在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。1、细胞分化的概念一、知识回顾黑色素细胞在体外培养30多代后仍能合成黑色素；离体培养的上皮细胞，始终保持为上皮细胞，而不会变成其他类型的细胞。2、稳定性3、不可逆性细胞分化发生在整个生命进程中。1、持久性2、细胞分化的特点造血干细胞原红细胞早幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞成熟红细胞死亡4、普遍性细胞分化是否意味着细胞中遗传物质的改变？遗传物质没有改变，不同组织的细胞共同来源于受精卵，经有丝分裂产生。3、细胞分化的实质ABDCEEDCAB

2、EDCABEDCABEDCAB基因在个体发育过程中，不同细胞中遗传信息的执行情况不同即基因的选择性表达的过程红细胞合成血红蛋白(不合成肌动蛋白)肌细胞肌动蛋白基因开启合成肌动蛋白(不合成血红蛋白)肌动蛋白基因关闭血红蛋白基因关闭血红蛋白基因开启试一试:现在你能解释这些现象了吗?4、细胞分化的结果细胞产生了不同种类的蛋白质即出现了不同的结构和功能愈伤组织胚状体1958，美国，斯图尔德植物组织培养离体二、基础知识（一）植物组织培养概念关键词：外植体、脱分化、再分化、愈伤组织在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件

3、，诱导其脱分化产生愈伤组织再分化形成丛芽，最终形成完整的植株。又称：植物离体培养脱分化（或去分化）：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。愈伤组织：细胞排列疏松、无规则、高度液泡化的无定形的薄壁细胞。切取形成层无菌接种诱导愈伤组织的形成试管苗的形成培养室移栽脱分化再分化（二）植物组织培养的基本过程植物组织培养过程离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素再分化一般不需要光需要光（三）植物组织

4、培养的理论基础---细胞全能性概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。基础：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。表达条件：离体条件无菌操作适宜物质的诱导和调节（植物激素）适宜的营养物质温度、酸碱度、光照等条件的控制思考这个试验说明了已经分化的细胞核具有什么特性？高度分化的动物体细胞的细胞核有发育成完整个体的潜能对比：多利羊的诞生动物细胞有没有这种能力？已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。细胞全能性思考为什么已经分化的细胞具有全能性呢？高度分化的细胞含有保持物种发育所需要的全套基因植物组织培养技术动物的克隆技术1、培育无病毒

5、植株2、大规模培养愈伤组织（提取紫草素，治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法（受体细胞为植物细胞）（四)植物组织培养的应用：3、人工种子（解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题）三、影响植物组织培养的因素1、材料的种类、年龄及保存时间长短等2、营养3、植物激素4、PH、温度、光照等条件1、植物材料的选择---直接关系实验的成败①不同植物的组织培养难度不同eg：烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝②同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的

6、长短等也会影响实验结果。2、营养---MS培养基A、大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、SB、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、CoC、有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖D、植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等Ｎ、Ｐ主要影响蛋白质、核酸的合成；K、Ca、Mg、S主要影响酶的活性。无机盐强调：蔗糖既是碳源也是调节渗透压的物质；MS固体培养基成分及比例讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的

7、渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。常用植物激素：生长素、细胞分裂素等生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势激素的使用顺序、使用的量及比例影响植物细胞的发育方向3、植物激素的影响生长素类：2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）等。细胞分裂