临床输血安全ppt课件.ppt

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1、临床输血安全1临床输血相容性检测血液选择临床输血2临床输血相容性检测项目：ABO血型正反定型RHD血型鉴定不规则抗体筛查与鉴定交叉配血试验3临床输血相容性检测方法：1、盐水玻片法2、盐水试管法3、聚凝胺法4、抗人球蛋白法5、酶法6、微柱凝集法（手工加样）7、微柱凝集法（自动加样）8、微板法4临床输血相容性检测方法：玻片法--便于显微镜观察结果试管法--适用于不同温度、便于洗涤反应温度：4～22℃临床意义：盐水凝集试验阳性，并在37℃也有活性的抗体是有意义的。这些抗体通常也能用其他方法证明。室温有活性，37℃无活性者临

2、床意义不大。5临床输血相容性检测试验结果判定与记录4+（++++）：一个大凝集块，背景透明，无游离细胞3+（+++）：数个大凝集块，背景透明，无游离细胞2+（++）：许多小凝集块，背景稍混浊，有游离细胞1+（+）：细小的凝集块，背景浑浊W+（±）：极细小凝集块，要用显微镜观察结果0（-）：无凝集，无溶血，细胞呈游离散在状PH：部分溶血;H：完全溶血6临床输血相容性检测7临床输血相容性检测8临床输血相容性检测结果分析：阳性-凝集或溶血阴性-无凝集无溶血先观察有无溶血、再观察有无凝集注意事项：细胞浓度2～5%（严格按说明

3、书操作）、血清与细胞比例、反应温度、弱凝集分析优点：简便、快捷、直观。缺点：不能发现不完全抗体。9输血免疫学基础回顾免疫球蛋白分5类：IgMIgGIgAIgDIgEIgG（单体）IgM（五聚体）10IgGIgM结构单体五聚体半衰期20~23天10天是否能通过胎盘是否是否可激活补体是是抗原结合部位2个10个最大作用距离14nm30nm注:红细胞在生理盐水介质中的间距约为25nm。11IgM与IgG▲▲▲介质为0.9NaClIgG▲IgG▲介质为0.9NaClIgG▲介质为0.9NaClIgG▲介质为0.9NaClIgG

4、▲▲IgG▲IgG▲12临床输血相容性检测抗人球蛋白试验原理IgG类血型抗体（主要是免疫抗体，如Rh血型抗体）分子量小，与红细胞相应抗原结合后，在盐水介质中不出现肉眼可见的凝集反应，称之为不完全抗体，但在加入抗人球蛋白后，以其搭桥作用则可出现凝集反应。补体成分在体内被红细胞抗原抗体复合物激活以后，结合在红细胞表面。在体外含补体的多克隆抗体，或抗C3b、抗C3d等单特异性抗体与补体致敏的红细胞反应，使之凝集也称为抗球蛋白试验。132不完全抗体可以结合在红细胞表面,但是不能和两个红细胞同时结合。3加入抗人球蛋白1红细胞彼

5、此之间有一定的间距4抗人球蛋白可以同时和两个不完全抗体的FC段结合，从而把红细胞连接在一起。抗人球蛋白法示意图14临床输血相容性检测注意事项:每次试验要设有阴性和阳性对照。实验器材清洁。注意抗原抗体比例、孵育时间、温度等条件严格按照实验方法操作。排除自身抗体干扰。15临床输血相容性检测微柱凝胶试验原理：微柱凝胶技术是用特定的化学物质做成微型凝胶柱，柱的上端有一个加样反应室。抗原抗体反应后离心，凝胶柱起过筛作用，红细胞凝集块不能通过凝胶的间隙而留在凝胶的上部，未凝集的红细胞通过凝胶的间隙，沉积到底部。16临床输血相容性

6、检测17结果显示18临床输血相容性检测微柱凝胶免疫技术的特点：使用安全操作简单结果稳定灵敏度高重复性好费用昂贵特殊仪器19临床输血相容性检测微柱凝胶试验注意事项严格按照试剂说明书操作。献血者DAT阳性，干扰结果判读。患者自身抗体干扰。注意加样顺序。配制细胞浓度准确。20临床输血相容性检测聚凝胺试验原理：聚凝胺是一种多价阳离子聚合物，在溶液中有多个阳离子基团，能中和红细胞表面的负电荷，并籍助正负电荷的作用，引起红细胞的非特异性凝集。当红细胞与血清在低离子介质中孵育后，IgG抗体与红细胞上相应的抗原结合，在聚凝胺的作用下

7、发生凝聚。凝集和凝聚在表面上不能区分，再加入枸橼酸钠重悬液，枸橼酸根的负电荷与聚凝胺上的正电荷中和，非特异性凝集现象消失，而真正的凝集不会消失。211红细胞间有一定间距2加入聚凝胺后，可以缩短红细胞之间的距离，使其非特异性凝集3加入枸橼酸钠，可以中和聚凝胺4红细胞的非特异性凝集消失聚凝胺法示意图1聚凝胺枸橼酸钠221红细胞上已有不完全抗体致敏2加入聚凝胺后，缩短红细胞之间的距离，让不完全抗体可以同时与两个红细胞结合使其特异性凝集3加入枸橼酸钠中和聚凝胺4由于不完全抗体的结合，红细胞的特异性凝集不消失聚凝胺法示意图2聚

8、凝胺枸橼酸钠不完全抗体23广义的血型:血型即血液中各种血细胞和血浆蛋白等成分所具有的表面抗原物质的多态性。狭义的血型:红细胞表面抗原物质的多态性。血型鉴定24临床输血相容性检测红细胞悬液浓度①2％　　　滴定抗体效价②5％　　　血型鉴定或间接Coom,sTest③10％　　　则用于测定抗体的亲合力④0.8%微柱凝胶抗体鉴定251试验技术原因：采样