血清浆脂类及脂蛋白测定ppt课件.ppt

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1、血清（浆）脂类及脂蛋白测定——1血脂的组成：甘油三酯(少量甘油二酯和甘油一酯)磷脂胆固醇和胆固醇酯非酯化脂肪酸（游离脂肪酸）等2血脂的运输形式—脂蛋白1、定义：指血浆脂质与载脂蛋白组成的可溶性的生物大分子。3磷脂胆固醇载脂蛋白甘油三酯胆固醇酯2、结构：脂蛋白微粒表面核心453、分类(1)按密度不同HDLLDLIDLVLDLCM6(2)按电泳时区带的泳动位置不同CMHDLVLDLLDLCMβ-LP前β-LPα-LP＋α-LP前β-LPβ-LPCM7临床血脂测定的常见项目：8实验51：磷钨酸-镁沉淀法测

2、定高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）9提取HDL测定胆固醇实验原理：10超速离心法层析法电泳法☆沉淀法提取HDL的方法：11沉淀法原理：ApoB+多阴离子化合物沉淀↓12硫酸葡聚糖--Mg2+肝素--Mn2+磷钨酸--Mg2+多阴离子（polyanion）化合物13过氧化物酶胆固醇+O2胆甾烯酮+H2O2H2O2+酚+4-氨基安替比林亚胺醌+H2O胆固醇测定（酶法）：14试剂：沉淀剂酶试剂参考血清（TC测定用的定值血清）15操作步骤：取血清和沉淀剂各200μl，充分混匀，置室温放置10min后，250

3、0r/min，15min，吸取上清液按表进行操作。1、提取HDL16加入物(μl)空白管标准管测定管上清液——50参考血清—50—蒸馏水50——酶试剂200020002000混匀，37℃水浴15min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。2、测定胆固醇17计算：参考值：HDL-C(mmol/L)测定管吸光度标准管吸光度×=定值血清胆固醇浓度5.170.9~2.0mmol/L218注意事项：1、血清标本要及时测定——（在室温条件下，各型脂蛋白之间会发生脂质交换）；——（游离的胆固醇会不断酯化

4、）。2、离心过程中防止温度过高（室温15~25℃），离心后放置时间不能过长。——（温度过高使沉淀不完全）。19临床意义：具有抗动脉粥样硬化作用，是冠心病的保护因素。2021磷酸甘油氧化法测定血清甘油三酯（TG）实验49：22甘油三酯(TG)的结构：23甘油三酯测定的方法：化学法酶法24化学法（KOH）（过碘酸）皂化氧化抽提甘油甲醛显色25甘油三酯甘油甲醛变色酸紫红色26甘油三酯3-磷酸甘油+ADP+ATPO2、H2O+磷酸二羟丙酮+H2O2甘油+脂肪酸+酚、4-氨基安替比亚胺醌+H2OLPLGKGP

5、OPOD☆酶法（磷酸甘油氧化酶法）27试剂：酶试剂2.26mmol/L的三油酸甘油酯标准液28操作：加入物(μl)空白管标准管(×2)测定管(×2)上清液——20参考血清—20—酶试剂20002000200037℃水浴10min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。29计算：TG(mmol/L)测定管吸光度标准管吸光度×=标准液浓度参考值：0.56~1.70mmol/L2.26mmol/L30临床意义：增高:与动脉粥样硬化关系密切、家族性的脂代谢紊乱、糖尿病等。降低:营养不良、消化吸收综合

6、征、消耗性疾病等。31注意事项：标本：标本要求是餐后12-14h的空腹血液——（血清TG易受饮食影响）。标本存放不宜超过3天——（避免TG水解而释放出甘油）。试剂：酶试剂应4℃避光保存，出现红色不可再用。32免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白A1和载脂蛋白B实验53：33抗原抗原抗体复合物抗体+ApoA1ApoBApoA1抗体ApoB抗体比色原理：34ApoA1与高脂血症、冠心病呈负相关；ApoB与高脂血症、冠心病呈正相关。临床意义：35