总皂苷的测定方法.docx

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1、A1总皂苷的测定方法方法来源：《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）保健食品中总皂苷的测定方法（分光光度法）A1.1试剂Amberlite-XAD-2大孔树脂，Sigma化学公司U.S.A正丁醇分析纯乙醇分析纯中性氧化铝层析用，100-200目人参皂苷Re购自中国药品生物制品检定所香草醛溶液称取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100ml。高氯酸分析纯冰乙酸分析纯人参皂苷Re标准溶液：精确称取人参皂苷Re标准品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0ml，即每毫升含人参皂苷Re2.0mg。A1.2仪器比色计、层析柱A1.3试验步骤A1.3

2、.1试样处理A1.3.1.1固体试样：称取1.000g左右的试样（根据试样含人参量定），置于100ml容量瓶中，加少量水，超声30min，再用水定容至100ml，摇匀，放置，吸取上清液1.0ml进行柱层析。A1.3.1.2柱层析：用10mL注射器作层析管，内装3cmAmberlite-XAD-2大孔树脂，上加1cm中性氧化铝。先用25ml70%乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25ml水洗柱，弃去洗脱液，精确加入1.0ml已处理好的试样溶液（见3.1），用25ml水洗柱，弃去洗脱液，用25m170%乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，置于60℃水

3、浴挥干。以此作显色用。A1.3.1.3显色：在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2ml5%香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣都溶解，再加0.8ml高氯酸，混匀后移入5ml比色管中，塞紧盖子于60℃水浴上加热10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5.0ml，摇匀后，以1cm比色池于560nm波长处与标准管一起进行比色测定。A1.3.1.4标准管：吸取人参皂苷Re标准溶液（2.0mg/ml）100μl放蒸发皿中，放在水浴挥干（低于60℃），或热风吹干（勿使过热），以下操作从“3.2柱层析……”起，与试样相同。测定吸光度值。A1.4计算：X=

4、式中：X：试样中总皂苷量（以人参皂苷Re计），g/100gA1：被测液的吸光度值　　A2：标准液的吸光度值　　　C：标准管人参皂苷Re的浓度，μgV：试样稀释体积，mlm：试样质量，g计算结果保留二位有效数字。