专题2课题1《微生物的实验室培养》学案.doc

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1、专题2课题1《微生物的实验室培养》学案［学习目标］知识目标：1.举例说明有关培养基的基础知识2.概述无菌操作技术包括的主要内容能力目标：掌握纯化大肠杆菌的基木操作【学习过程】第一部分：自主预习一、基础知识（_）蜓养基1.概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其—的营养基质叫培养基。培养基的种类包括培养基和培养基等。2.培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分。3.在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加;培养霉菌时需要将培养基的PH调至:培养细菌时需要将培养基的PH调

2、至:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。【补充】碳源：如C02、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白豚等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、0、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。蔗糖是提供碳源的，也就是提供能源的，琼脂是凝固剂（二）无菌技术1.获得纯净培养物的关键是。避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①对实验操作的、操作者的衣着和手进行清洁和C%1将用于微生物培养的器1111、接种用具和培养基等器具进行O%1为避免周围环境屮微生物的污染，实验

3、操作应在附近进行。%1实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。2.消毒和灭菌（1）消毒是指使用仅杀死物体表面或的部分微生物（不包括和）。常用的消毒方法有、。此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。此外，实验室里还用或进行消毒。（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体的微生物，包括芽砲和抱了。常用的灭菌方法二、实验操作本实验用培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分成两个阶段进行。L制备牛肉膏蛋片腺固体培养棊到平板2.纯化大肠杆菌微生物接种的方法中最常用的是和0（1）平板划线法是指接种环在琼脂固体培养基表血的操作，将聚集的菌种到培养基的表面。平板

4、划线的操作步骤如下：（2）稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的,然后将不同的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度的菌液时，聚集在一起的微生物将被分散成,从而能在培养基表面形成单个的。三、结果分析与评价1.如果接种大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基木一致，说明接种符合要求。1.若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程屮未达到要求。2.的作为对照的培养基，在培养过程中出现了菌落，则说明培养基不彻底,实验失败。U2、菌种的保存1.对于频繁使用的菌种，我们可以采用法；2.对于需要长期保存的菌种，可以采用法。第二部分：课中探究探究一

5、：消毒与灭菌的比较条件结果常用方法对象共同点消毒灭菌探究二：有关“倒平板”操作1.培养基灭菌后，需要冷却到50°C左右，才能用来倒平板。你川什么方法来佔计培养基的温度?2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4.在倒平板的过程屮，如果不小心将培养基溅在川L盖与川1•底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？探究三：有关“平板划线法”操作1.为什么在操作的第一步以及每次划线Z前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却示再进行划线?3.在作第二次以及其

6、后的划线操作是为什么总是从上一次划线的末端开始划线?探究四：有关“稀释涂布平板法”操作1.系列稀释操作屮丿'V注意的事项冇哪些?1.涂布平板的所有操作部应在火焰附近进行，结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，涂布平板操作的第2步应如何进行无菌操作？第三部分：课后练习1.下列措施屮不属于消毒的是（）A.酒精擦拭双手B.向水屮通入少量Cl2C.皮肤受伤处涂紫药水D.灼烧接种环2.有关平板划线操作的叙述，正确的是（）A.使用已灭菌的接种环、培养1111,操作过稈屮不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C.把111L盖打开

7、，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置，放入培养箱屮培养3.下列有关平板划线接种法的操作错误的是（）A.将接种环放在火焰上燃烧B.将已冷却的接种环伸入菌液屮蘸取一环菌液C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D.接种环划线要将最后一区的划线与第一区的划线相连4.关于制备牛肉膏蛋白豚固体培养基的叙述错谋的是（）A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.等培养基冷却至50°C左右时进行倒平板D.将平板冷却凝固5-10分钟后将平板倒过来放置5.细菌培养过稈分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰

8、灼烧等儿种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（）A.接种环、手、培养基B.高压锅、