《细菌的遗传分析》PPT课件.ppt

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1、第二节细菌的遗传分析一、转化二、接合(杂交)三、性导四、转导细菌与细菌之间的遗传物质的交流(拟有性过程)有四种不同的方式:9/4/20211一、转化(Transformation)细菌通过细胞膜摄取周围环境中DNA片段,并通过重组将其整合到自身染色体中的过程,称为转化。当外源DNA进入宿主后,使宿主产生新的表现型时就能测知转化的发生。关于转化,将在遗传的分子基础中讲解。9/4/20212二、接合(conjugation)在原核生物中,两个细胞在相互接触过程中,遗传物质从一个个体转移到另一个个体的现象称为接合。输

2、出遗传物质的个体称为供体(donor),又称为“雄性”。接受外源遗传物质的个体称为受体(receptor),又称为雌性。E.coli(大肠杆菌)是遗传学研究中应用最为广泛的细菌。野生型的E.coli可以在只含有盐类和葡萄糖的简单培养基上生长。9/4/20213(一)杂交实验1946年,Leaderberg和Tatum发现E.coli可以通过接合交换遗传物质。选用两个不同营养缺陷型的E.coli菌株,A和B。A菌株需要在基本培养基中补充甲硫氨酸(met)和生物素(bio),B菌株需要在基本营养培养基上补充苏氨酸(

3、thr)和亮氨酸(leu)才能生长。采用多营养缺陷型是为了防止回复突变干扰试验结果。9/4/20214黎德伯格和塔特姆接合试验9/4/20215A和B均不能在基本培养基上生长,但若将A和B在完全液体培养基上培养几个小时以后再涂布在基本培养基上,就能长出一些原养型(met+bio+thr+leu+)的菌落。细菌的野生型又称为原养型。这种原养型菌落的出现是由于营养上的互补,还是由于两种不同类型细胞直接接触而交换了遗传物质的结果呢?黎德伯格和塔特姆接合试验9/4/20216U型管试验1950年,Davis设计了一种U

4、型管试验。试验说明:两个菌株间的直接接触是原养型细菌出现的必要条件。9/4/20217(二)F因子1952年,Hages通过实验证明,在结合过程中,遗传物质的转移是单向的。一个菌株(如A菌株)是供体,而另一菌株(如B菌株)是受体。A菌株之所以能成为供体,是因为它含有一个性因子(sexfactor)又称致育因子(fertilityfactor),简称F因子。携带F因子的菌株称为供体菌或雄性,用F+表示。没有F因子的菌体称为受体菌或雌性,用F-表示。9/4/20218(二)F因子F因子是一个小型的双链环状DNA分子

5、,是染色体外遗传物质,是质粒的一种,在分类学上属于附加体(episome)。它既能以自主状态存在于细胞质中,又能整合到细菌的染色体内。F小环与主染色体大环之间发生一次交换就可以插入到宿主染色体中。F因子整合到E.coli染色体上以后,该菌株就成为高频重组株(Highfrequencerecombination,Hfr),以Hfr表示。9/4/20219F因子9/4/202110F因子的存在状态9/4/202111(二)F因子F因子处于自主状态时,可以不依赖宿主细胞的染色体而独立复制(每个F+细胞只有一个F因子)

6、。据研究,F因子至少包含有15个基因,其中有的基因控制F(或性)伞毛(Fpillus)的形成,F伞毛是F+细胞表面伸出的一种长附属物。F+与F+之间互不理睬,但F+和F-一旦相互接触,F伞毛就变成了两个细胞之间原生质的通道,叫做结合管(conjugationtube)。F+细胞中的F因子由结合管向F-传递,使F-变成F+。9/4/202112F因子及其在杂交中的行为9/4/202113(三)高频重组高频重组菌株(Hfr)与F-杂交时,重组频率很高,而F-很少转变为F+。后来发现,Hfr中F因子整合到细菌染色体上

7、了。9/4/202114(三)高频重组在Hfr中,F因子的复制是与宿主染色体同步进行的。当Hfr×F-时,Hfr细胞可以把部分甚至全部染色体传递给F-受体,而且当供体和受体带有不同的标记基因时,相互之间的重组频率很高,故而被称为Hfr(Highfrequencerecombination)。9/4/202115(三) 高频重组9/4/202116(四)细菌的交换过程当Hfr菌的部分染色体进入F-后,F-细胞中就有一段DNA具有2份拷贝,被称为部分二倍体(partialdiploid)或部分合子(merozygo

8、te)。新转入的DNA片断称为供体外基因子(exogenote),而受体的染色体称为受体内基因子(endogenote)。9/4/202117细菌的交换过程9/4/202118(四)细菌的交换过程外基因子和内基因子可以发生交换而产生基因重组。部分二倍体中,若发生单数交换是没有意义的,因为单交换使环状的内基因子打开成为线性DNA,这种细胞是不能成活的。发生偶数次交换才能产生可遗传的重组体

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