细菌的遗传分析ppt课件.ppt

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1、本章重点和难点：了解细菌进行遗传物质交流的方式，掌握细菌染色体作图的方法。第七章细菌的遗传分析细菌和病毒在遗传研究中的优越性世代周期短T7phage20—30minE.Coli20min群体大一支试管数以百万计遗传物质简单一条裸露的核酸单倍体不存在显隐关系第一节细菌的细胞和基因组12μm×0.5μmDNA长约1100μm分子量约2.6×109细胞结构细胞膜拟核细胞质（核糖体）细胞壁（鞭毛伞毛荚膜芽胞）与真核细胞的差异缺乏线粒体、叶绿体，无核膜；染色体裸露的共价闭合环状双链DNA分子附加体小型环状DNA(质粒)游离或整合状态细菌遗传的实验研究方法

2、(一)细胞计数(培养物细胞浓度)(二)建立纯系的方法(三)选择培养法鉴定突变型与重组型(四)突变型与重组型的批量筛选方法(一)细胞计数(培养物细胞浓度)培养物中微生物计数方法是微生物学的基本实验技术，其基本思路是：对原培养物进行连续稀释；进行平板涂抹培养；由于每个细胞形成一个菌落，计数菌落数；根据稀释倍数计算原培养物中的细胞浓度。(二)建立纯系的方法——纯培养挑取由单个细胞繁殖而来的菌落进行培养就可以获得由一个细胞繁殖而来的纯系。通常采用平板表面涂布法或划线法可以获得单菌落。这种方法获得的纯系，称为“菌种纯”。有时采用显微操纵器进行菌丝尖端切割等

3、方法从单个细胞直接培养建立纯系。采用这种方法获得的纯系称为“菌株纯”。(三)选择培养法鉴定突变型与重组型许多细菌的突变都与培养基营养成分及培养条件有关。营养缺陷型的筛选、鉴定：选择培养法是根据菌株在基本培养基和营养培养基上的生长表现将菌株分为原养型(也称为原生营养型)和营养缺陷型(在基本培养基上不能正常生长，只能在相应的营养培养基上生长)。其它突变类型的筛选、鉴定：对于其它的突变类型(如温度敏感型)，也可以通过培养条件的选择培养来筛选与鉴定。(四)突变型与重组型的批量筛选方法为高效检测、分离混和群体中不同突变型，黎德伯格夫妇设计了影印培养法。该方

4、法原理与选择培养法一致，但是采用影印法将在完全培养基上单菌落同时接种到不同选择培养基上同时对所有菌落进行选择培养，鉴定效率大大提高。影印培养法把长有许多菌落的母种培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木质圆柱印章上，使其沾上来自平板上的菌落。然后可把这一“印章”上的菌落一一接种到不同的选择性培养基平板上。待这些平板培养后，对各平板相同位置上的菌落作对比后，就可选出适当的突变型菌株。影印培养法MM-原养型MM+lay赖氨酸缺陷型MM+leu亮氨酸缺陷型MM+arg精氨酸缺陷型注意：(1)最初的培养基必须是非选择性的，即各种突变型都能够在其上生长；(2)必须采

5、用适当的方法如涂布或划线法，以使培养物菌落之间要分开。接合转化第二节细菌的染色体作图性导转导1.接合现象的发现1946年J.Leaderberg和E.TatumE.ColiK-12菌株Amet-bio-thr+leu+thi+菌株Bmet+bio+thr-leu-thi-一.接合单基因突变率10–6回复突变10-12or10-18如何产生？原养型的出现以A、B菌株直接接触为前提隔离培养后不出现原养型2.F因子及其转移1952年，W.HayesA菌株B菌株链霉素AB混合培养，原养型重组体链霉素BA混合培养，×细菌接合中遗传物质转移单向过程（即从A

6、→B株）细菌分为两个类群（两种接合型)供体（或雄菌株）受体（或雌菌株）2.F因子及其转移致育因子（或F性因子，也叫F质粒）染色体外的一个共价环状DNA分子（94.5kb细菌DNA的2%1/3基因与接合有关)接合：原核生物中，遗传物质从供体（“雄性”）转移到受体（“雌性”）的过程。2.F因子及其转移据F因子有无以及存在状态E.Coli有三种类型：F﹣不含有F因子F+含有一个自主状态的F因子Hfr(高频重组菌株）含有一个整合到染色体上的F因子F+×F﹣→F+F性伞毛诱导traYz基因表达，产生核酸内切酶Hfr×F﹣→多数为F﹣有4个大肠杆菌菌株1、2

7、、3和4的基因型均为a＋b－,另外4个菌株5、6、7和8的基因型为a－b＋,将两种不同基因型的菌株充分混合后进行平板培养，以确定a＋b＋重组子的频率。在以下结果中，M表示许多重组子，L表示少量重组子，O表示无重组子，请根据下述结果，指出每一菌株的性别类型（Hfr、F＋还是F-）1234OMMOOMMOLOOM8OLLO1×7,2×8,3×8→L1、2、3、7、8不是Hfr2×5,2×6,3×5,3×6,4×7→M5、6、4是Hfr,2、3、7是F－1×5,1×6,1×8,2×7,3×7,4×8→O1是F+8是F+F+F－F－HfrHfrHfrF－

8、F+3.中断杂交试验及染色体作图1957年E.Wollman和E.Jacob设计Hfr菌株strsazirtonArgal+lac+F﹣