体外仿生法研究牡蛎和蛤仔体内微量金属元素的生物可给性.pdf

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1、第44卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告第2期2016年2月ChineseJournalofAnalyticalChemistry247～25lDOI：10．11895／j．issn．0253-3820．150655体外仿生法研究牡蛎和蛤仔体内微量金属元素的生物可给性王增焕王许诺林钦陈成桐陈瑛娜(中国水产科学研究院南海水产研究所，农业部水产品加工重点实验室，广东省渔业生态环境重点实验室，广州510300)摘要采用体外全仿生消解方法，模拟人体的消化道环境，对牡蛎和蛤仔样品进行仿生消解，分析牡蛎和蛤仔体内微量元素的生物可给性。以原子吸收光谱

2、法测定胃、肠仿生提取液中微量元素的含量。结果表明，牡蛎胃提取液中Fe，cu，zn，cd的含量明显高于肠提取液中的含量，蛤仔胃提取液中Fe，cu的含量与肠提取液中的含量没有明显差异，而zn，cd的含量远高于其在肠提取液中的含量。经全仿生消解后，牡蛎体Fe，cu，zn，cd的可给性分别为60．2％，83．6％，83．1％，76．8％；蛤仔Fe，cu，zn，cd的可给性分别为46．3％，86．3％，85．3％，87．7％。本研究结果为进一步研究牡蛎和蛤仔对金属元素的累积和迁移、生物可利用性，cd等有害元素对食用者的健康风险评估，提供技术支持和理论依据。

3、关键词体外仿生消解；生物可给性；原子光谱法；微量元素；牡蛎和蛤仔1引言牡蛎和蛤仔是常见的两种贝类，营养丰富、蛋白质含量高、脂肪含量低，易被人体消化吸收，深受消费者的青睐¨J。牡蛎和蛤仔的Fe，zn，cu等多种生命必需元素含量高J，具有较高的食用价值与保健作用。另一方面，牡蛎和蛤仔生活在沉积物表面，受养殖环境影响，一些有害元素如cd等的含量也比较高。。’，对食用安全有潜在的危害。金属元素在生理和病理中有重要作用_1U，“J。氨基酸等营养物质可以在人体内合成，但微量元素必须从饮食中获取_l，并且随着能量的消耗而流失。但是，所有通过膳食途径进入人体的物

4、质，包括营养物质和有害物质，首先要在消化液作用下从食物基体上释放出来，才有可能被机体组织利用，成为潜在的生物可利用部分，即生物可给性，坞。许多关于牡蛎和蛤仔体内微量元素的研究，主要以元素的总量为基础，分析必需元素的功能作用，讨论有害元素对食用者的危害J。本实验采用体外全仿生消化法，应用仿生消化液对牡蛎和蛤仔样品进行消解，以原子吸收光谱法测定胃、肠仿生提取液以及剩余残渣中Fe，cu，zn和Cd的含量，分析牡蛎和蛤仔中微量金属的生物可给性。2实验部分2．1仪器与试剂HITCHZ-2000型原子吸收分光光度计(日本Hitachi公司)；Ethos1型微

5、波消解系统(意大利Milestone公司)；ALPHA1型真空冷冻干燥机(德国Christ公司)；ZHWY-200D型气浴恒温振荡器(中国智诚公司)，AnkeDL-6000B型低温离心机(中国安亭公司)。HNO、HO：(优级纯，广州试剂厂)；牛血清白蛋白(分析纯，广州威佳科技有限公司)；黏液素(分析纯，广州鼎国生物技术有限公司)；胃蛋白酶、胰酶、脂肪酶、胆汁、O／一淀粉酶、氨基葡萄糖盐酸盐、葡萄糖醛酸、葡萄糖、尿素、尿酸等试剂(分析纯，上海晶纯生化科技股份有限公司)；多元素混合标准溶液(10mg／L，上海市计量测试技术研究院)。2．2样品制备牡蛎

6、和蛤仔采集于广东沿海主要养殖区，现场用海水冲洗干净外壳后，取出软组织，一20℃保存，带2015-08—18收稿；2015—10-16接受本文系国家科技支撑计划课题(No．2009BADB7B02)、农业部水产品加工重点实验室开放基金(No．NYJG201306)、中央级科研院所基本科研业务费专项资金(Nos．2013YD08，2015TS16)资助$E-mail：zh-wang121l@163．corn248分析化学第44卷回实验室。在实验室再用真空冷冻干燥机冻干后，用玛瑙研钵研磨成均匀粉末，待用。2．3仿生消化液制备参照文献[18，19]制备仿

7、生消化液，由一定的生物酶和适当的无机盐与有机物制成如下：仿生唾液烧杯中加入10mLKC1溶液(89．6g／L)、10mL硫氰化钾(KSCN)溶液(20L)、10mLNaH2PO4溶液(88．8L)、10mLNa3PO4溶液(57L)、1．7mLNaC1溶液(175．3L)、1．8mLNaOH溶液(40g／L)，再加入8mL尿素溶液(25g／L)和145mg-淀粉酶、15mg尿酸、50mg粘液素，用HC1或NaHCO溶液调pH至6．5±0．2，用超纯水定容至500mL，在4~C保存。仿生胃液烧杯中加入15．7mLNaC1溶液(175．3g／L)、3

8、．0mLNaH2PO溶液(88．8g／L)、9．2mLKC1溶液(89．6g／L)、18mLCaC12溶液(22．2g／L)、8．3mL