慢性炎症对终末期肾病大鼠血管钙化的影响及机制研究.pdf

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1、目录l慢性炎症对终末期肾病大鼠血管钙化的影响及机制研究⋯11．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．4材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．5结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯221．6讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯331．7结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4l1．8参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯421．9英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯472致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯483终末期肾病继发高磷血症所致血管钙化的研究进展(综述)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49慢性炎症对终末期肾病大鼠血管钙化的影响及二一摘要目的研究慢性炎症对终末期肾病大鼠血管钙化的影响及机制，为寻找防治终末期肾病血管钙化的有效措施提供实验性理论依据。方法(1)慢性肾衰动物模型的制备：成年雄性SD大鼠30只，体重(2004-20)g，随机分为对照组(Ctr，n=6)、慢性肾衰组(CRF，n=12)、慢性肾衰+炎症组(CI江+I，n=12)。72h后，每天分别以生理盐水(10m

3、l／Kg)、腺嘌呤(300mg／Kg)和腺嘌呤(300mg／Kg)灌胃6周，其中(CRF+I)组隔日以10％casein皮下注射(1．29／Kg)，观察大鼠一般精神状态、饮食和死亡率等。(2)标本处理及指标检测：造模6周后，大鼠用3％戊巴比妥钠(30mg／Kg)腹腔麻醉后，腹主动脉取血备用，化学比色法检测血清生化指标(血钙、血磷、血肌酐和血尿素氮)和ELISA法检测血甲状旁腺激素；取胸主动脉，其中5mm用4％的中性甲醛固定作VonKossa钙染色和免疫组化检测a．SMA蛋白表达，其余部分存于一70℃冰箱用于RT-PCR检测(IL．6、BMP．2、Cbfa．1、Wn

4、t3a和ALP的mRNA表达)。结果(1)血清生化指标：6周后CRF和(CIU+I)组大鼠出现了明显肾功能衰竭表现，组间血肌酐值(gmol／L)和尿素氮值(mmol／L)比较，CRF(270．93+29、27．9+4．1)和(CI讧+I)组(270．63+24．54、33．65+8．26)均高于Ctr组(66．854-1．5、6．624-0．28)，差异有统计学意义(尸O．05，下同)；CRF和(CRF+I)组均有钙磷代谢紊乱，组间血钙值(mmol／L)比较，CRF组(2．23+0．09)最低

5、，(CRF+I)组(2．37+0．1)次之，Ctr组(2．57+0．14)最高，组间差异均具有统计学意义；组间血磷值(mmol／L)比较，CRF(5．23+0．27)和(CRF+I)组(5．37+0．42)均高于Ctr组(2．1+0．2)，差异有统计学意义，CRF和(CI讧+I)组间差异无统计学意义。(2)甲状旁腺激素(ng／L)的ELISA检N-CRF(42．70+3．29)和(CRF+I)组(43．98+2．49)均高于Ctr组(29．60士2．85)，差异有统计学意义，而CRF和(CRF+I)组间差异无统计学意义。(3)形态学检测：OVonKossa染色：结

6、果显示Ctr和CRF组胸主动脉并无明显可见的阳性钙化染色，而(CRF+I)组胸主动脉有不同程度的明显的钙染色。②仅．SMA蛋白表达情况：Ctr组0【．SMA蛋白表达量(O．16+0．01)最高，CRF组(O．13+0．01)次之，(CRF+I)组(O．08士0．04)最低，组间差异均具有统计学意义。(4)IL．6、BMP．2、Cbfct．1、Wnt3a和ALPmRNA相对表达量的RT-PCR检测结果：IL．6mRNA的相对表达量，(CRF+I)组(0．85+0．35)大于CRF(O．58+0．13)和Ctr组(O．51i-0．18)，组间差异有统计学意义，而CRF

7、和Ctr组间差异无统计学意义；BMP．2、Wnt3a和Cbfa．1mRNA的相对表达量，CRF(1．01士0．28、O．81+0．23、1．38+0．56)和(CIU+I)组(1．30+0．43、0．94+0．40、1．47士0．55)均高于Ctr组(O．54+0．17、0．43+0．09、0．72+0．25)，组间差异有统计学意义，而CRF和(CI讧+I)组间差异无统计学意义；ALPmRNA的相对表达量，(CRF+I)组(O．62+0．22)高于Ctr2(O．08+0．16)和CI强组(O．13+0．25)，而Ctr和CI强组组间差异无统计学意义。结论1．慢性肾

8、功能衰竭继