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时间:2018-05-06
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1、绿茶对实验大鼠血管钙化的影响:徐华,万定,杨晓明,杨晓玲,李桂忠,王恬,吴海,曹军【摘要】 目的观察饮用绿茶对大鼠血管钙化的影响及其可能机制。方法用肌注维生素D3和灌胃尼古丁诱导大鼠血管钙化模型。实验分为对照组、钙化组、低剂量和高剂量绿茶干预组。VonKossa染色,原子吸收分光光度法测定钙含量,放射免疫分析法测定血浆、血管骨钙素(osteocalcin,OC)、血管紧张素Ⅱ(angiotensinII,AngⅡ)及碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性。结果钙化组大鼠血管染色见平滑肌细胞内和细
2、胞间基质有大量黑色颗粒聚集;与对照组相比,主动脉钙含量、ALP活性、OC和AngⅡ含量均有明显增加;采用50g/L和100g/L绿茶防治大鼠均可抑制血管钙化,且高剂量时效应强于低剂量;与钙化组相比较,血管组织钙化指标均下降,而主动脉AngⅡ含量亦有减少。结论饮用绿茶可能部分通过拮抗血浆和血管组织局部的AngⅡ系统效应而产生抑制大鼠血管组织钙化的作用。【关键词】绿茶大鼠血管钙化血管紧张素Ⅱ Abstract:ObjectiveToexplorethepossiblemechanismodeladebyvitaminD3in
3、tramuscularinjectionandoralnicotine.Ratseasuredbyatomabsorptivespectrophotography;thealkalinephosphatase(ALP)activityinplasmaandaorta;andthelevelsofosteocalcin(OC),angiotensinII(AngⅡ)inplasmaandaortainedbyradioimmunoassay.ResultsAlargenumberoflackgranulesamongthes
4、moothmusclecellsanditsmatrixincalcifiedaortabyVonKossastaininginVDNgroupcontents,ALPandOCorepotentthantheformer.Afterthegeenteatreatment,thetotalaortaCa2+contents,ALPactivity,andOClevelsentsignificantlydecreasedAngⅡlevel.ConclusionTheresultsindicatedthatgreenteaco
5、uldsignificantlyattenuatethecalcificationinrataortapartlythroughtheantagonismincirculationandvasculartissues.group KeyRNA的表达,使c-Jun氨基端激酶(JNK)的激活受阻,从而抑制由AngⅡ刺激产生的血管平滑肌细胞肥大,防治心血管疾病(高血压、动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄等)[4]。但绿茶与血管钙化之间的关系尚未见报道。本研究在大鼠血管钙化的模型上,观察饮用绿茶对血管钙化的影响,以探讨绿茶对血管钙
6、化的作用及其可能机制。 1材料与方法 1.1材料 雄性Sprague-Daa公司;维生素D3购自上海通用药材有限公司;绿茶购自浙江省东阳市东白山茶场;大鼠骨钙素、血管紧张素Ⅱ放免试剂盒购自北京科美东雅生物技术有限公司;碱性磷酸酶测试盒购自南京建成生物技术有限公司;其余试剂均为市售分析纯。 1.2大鼠血管钙化模型的制备 参照文献[5]方法制备大鼠血管钙化模型。24只大鼠随机分为4组(每组6只):①钙化组(VDN):维生素D3(300000IU/kg)肌肉注射,同时尼古丁(25mg/kg溶于花生油)灌胃,9h后尼古丁
7、重复灌胃1次,每天予凉白开水自由饮水;②钙化+低剂量绿茶组(VDN+TL,简称低剂量组):在钙化处理的基础上,每天予以饮用50g/L的新鲜绿茶(绿茶50g/L,自来水煮沸后温度降至80~90℃,于玻璃烧杯中泡制15min),连续自由饮茶6周;③钙化+高剂量绿茶组(VDN+TH,简称高剂量组):处理方法同②,绿茶浓度为100g/L;④对照组:操作同①,肌肉注射生理盐水和单纯花生油灌胃。 各组大鼠常规饲养,定期称重,监测饮水量,钙化处理6周后乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉,心脏取血,肝素抗凝,分离血浆,-70℃冻存备用。摘取全
8、长胸腹主动脉,取5mm升主动脉用10%中性福尔马林固定,用于组织学观察,其余部分作下述测定。 1.3血管组织总钙含量测定[6] 取胸主动脉(约10mg)80℃烤干,加入2mol/L硝酸0.5mL,180℃消化并烤干,冷却后加入去离子水(含27nmol/L的氯化钾和27μmol/L的氯化镧)10mL复
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