课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (2).pptx

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时间:2020-01-28

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1、教材版本:人教版选修一专题二课题:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数单位:抚顺德才高级中学主讲人:赵丹阳课题CO(NH2)2+H2O→CO2+2NH3脲酶分离计数目的背景研究思路筛选菌株统计菌落数目设置对照???KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O牛肉膏蛋白胨琼脂水一、筛选菌株KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、水KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水配方一配方二配方三配方四“选择培养基”KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖琼脂水二、统计菌落数目1、稀释涂布平板2、显微镜直接计数利用血球计数板,在

2、显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。在稀释度足够高时,微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的,即一个菌落代表原先的一个单细胞。利用选择培养基进行尿素分解菌的分离过程中,从对应稀释倍数为106的培养基中,A、B两同学分别得到以下两种统计结果。1、A同学筛选出150个菌落。2、B同学筛选出50个菌落。B认为A的培养基被杂菌污染了,或培养基中混入了其他含氮物质,因而导致不能分解尿素的细菌也能在该培养基中生长。A确认为自己的操作无误,但也拿不出能令人信服的证据。请你帮助A同学改进实验,提供具有说明了的证据。设置对照—————同等条件下,培养空白培养基

3、?解决问题三、设置对照将未接种的培养基放在相同且适宜的条件下进行培养。将样液接种到牛肉膏蛋白胨培养基表面,放在相同且适宜的条件下进行培养接种了样液的选择培养基课题背景一、小组人员:每四人为一组二、讨论素材:教材P23-P24知识、学案的提示三、讨论内容:1、实验操作流程?(可画图)2、各步骤操作目的?3、画出培养基设置的实验组和对照组图示。四、讨论要求:以模块图或实物流程图方式表示五、讨论时间:5分钟六、小组汇报:随机抽取某组实验设计《小组讨论》土壤取样1样品的稀释与涂布2微生物的培养与观察3实验操作细菌的计数4《小组汇报》Q1:取样条件?部位?1、土壤取样2、样品的稀

4、释与涂布Q2:为什么样品需要稀释?不同微生物的稀释倍数一样吗?为什么?Q3:需要配置几种培养基?每个稀释倍数下一般设置几组平板?为什么?《思考问题》土壤中各种微生物的数量是不同的。例如:在干旱的土壤中的上层样品中:好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万,放线菌约为477万,霉菌数约为23.1万104105106实验组:接种对照组:未接种《动手画一画》3、微生物的培养与观察Q4:菌落的特征都有哪些?4.细菌的计数甲地取样,在稀释倍数为105的三个培养基中得平板上的菌落数分别为212、256、21,涂平板用的稀释液的体积为0.1mL,则每毫升样品中的菌落数为__个。乙地取样,在

5、稀释倍数为105的三个培养基中得平板上的菌落数分别为180、230、456,涂平板用的稀释液的体积为0.1mL,则每毫升样品中的菌落数为__个。农民应该选择在哪块地种植?orQ5:为了保证结果准确,一般选择菌落数在什么范围的平板上进行计数?Q6:为什么统计的菌落数往往比活菌的实际数目低?:尿素分解菌的鉴定课题延伸CO(NH2)2+H2O→CO2+2NH3脲酶培养基碱性变强酚红培养基变红课题小结课题小练1.下表为本课题使用的培养基,分析培养基配方,回答下面的问题。KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0

6、g用蒸馏水定容到1000mL(1)在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是____________________。(2)按物理性质划分该培养基属于________培养基,理由是培养基中含有________________;该类培养基常用于微生物的______________________等。(3)由于____________________________________,所以该培养基只能用于能够合成________的微生物的培养。用此培养基培养土壤浸出液能够从土壤中筛选出________的细菌。(4)在微生物学中,将________________

7、_________________________________________________________的培养基,称作选择培养基。课题小练2.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是()A.涂布了1个平板,统计的菌落数是230B.涂布了2个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238C.涂布了3个平板,统计的菌落数分别是21、212和256,取平均值163D.涂布了3个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值2333.在本实验操作中对使用的

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