泰乐菌素高产菌株的推理选育-论文.pdf

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1、·12·AnimalHusbandry&VeterinaryMedicine2014Vo1．46No．6泰乐菌素高产菌株的推理选育徐红梅，郑黎，薛娟，陈双，叶蕊芳(1．华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海200237；2．河南天方药业股份有限公司，河南驻马店463003)摘要：以弗氏链霉菌CK6—6为出发菌株，分别采用紫外(uV)、甲基磺酸乙酯(EMS)、紫外与氯化锂(LiCI)复合、甲基磺酸乙酯与紫外复合4种方法对其进行诱变。比较了4种方法的最大提高率、致死率、正变率及突变株的传代稳定性，结果发现诱变效果

2、较好的为EMS与uV复合诱变，筛选出1株传代稳定菌株EU45一】5，相对于出发菌株CK6—6，泰乐菌素产量的提高率为15．36％。经HPLC分析发现，它的最高活性组分A的含量高于对照，提高率为48．28％。同时利用豆油作为筛选物质对弗氏链霉菌进行定向筛选，筛选效果较好，筛出1株高产稳定菌株03．6—8，效价提高率为12．15％。关键词：弗氏链霉菌；泰乐菌素；诱变筛选；豆油中图分类号：$859．79文献标志码：A文章编号：0529—5130(2014)06—0012—04Reasonableselectionofhig

3、h-yieldingstrainsofTylosinXUHongmei。，ZHENGLi，XUEJuan，CHENShuang，YERuifang(1．StateKeyLaboratoryofBioreactorEngineering，EastChinaUniversityofScienceandTechnology，Shanghai200237，China；2．HenanTopfondPharmaceuticalCo．，Ltd．，Zhumadian463003，China)Abstract：Uhraviolet(U

4、V)，ethylmethanesulphonate(EMS)，UVandlithiumchloride(LiC1)compound，EMSandUVcompoundwereusedformutationscreeningonCK6—6．Bycomparingthemaximumincreaserate，themortalityrate，positiverateandthestabilityofmutants，wefoundthatEMSandUVcompoundirradiationsdisplayedbetterm

5、utationeffectonStreptomycesfradiaeCK6-6．Byshakeflaskscreening，onestablehigh—yieldingmutantswasobtained：EU45—15．Tylosinyieldswasincreasedby15，36％．HPLCanalysisshowedthatthepercentageofthehighestactivecomponentAofEU45—15was48．28％，higherthanthatofcontro1．Simultaneo

6、us]Y，soybeanoilwasusedtoscreenhigh—yieldingstrainofS．fradiaeandprovedtohavegoodeffect．Intheselectedmutant03．6-8，theproductionoftylosinwasincreasedby12．15％．Keywords：Streptomycesfradiae；tylosin；mutationscreening；soybeanoil泰乐菌素(Tylosin)是由弗氏链霉菌(Strepto—行菌种筛选，Hesket

7、h等用1％NTG对弗氏链霉菌mycesfradiae)产生的一种大环内酯类抗生素。，由进行处理，处理4h之后，获得的突变菌株产量比出1个16元内酯环(泰内酯)和3个糖基组成。它是发菌株高5～6倍。万中义等也采用NTG(浓度2一种多组分抗生素，在发酵过程中同时存在四种主要mg／mL，处理时间2h)对弗氏链霉菌进行了2次诱组分，分别为泰乐菌素A、去碳霉糖泰乐菌素B、大变，获得的突变菌株效价比出发株高193％～300％。菌素C和雷洛菌素D。弗氏链霉菌在发酵初期的产物Shazia等先后利用紫外线(uV)和^y一射线(叫以泰乐

8、菌素A为主，随着发酵时间的延长，A组份Co)对弗氏链霉菌进行处理，得到菌株产量比出发与c组份比例发生转化，A组份相对减少，C组份相菌株高4．5倍。Liutskanova等利用uV和NTG(N应升高，由于A组分的生物活性最强，在发酵后期，一甲基一N一硝基一N一亚硝基胍)复合诱变，得到菌株需将C组分向A组分定向转化。泰乐菌素的产量相对于原始菌株最大