3种方法提取外周血dna比较分析

《3种方法提取外周血dna比较分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、实用医学杂志2013年第29卷第23期3933inAustralia[J]．NephrolDialTransplant，1998，13(1)：154—521．159．[12]朱伟平，崔彤霞，徐庆东，等．腹膜透析相关性腹膜炎的菌谱[6]傅鹏，董燕，袁伟杰，等．腹膜透析患者退出原因分析及处理及其药敏分析[J]．中国血液净化，2011，10(7)：357—359．[J]．中国血液净化，2002，1(4)：14—16．[13]文锐，宁建平．腹膜透析相关感染性腹膜炎病原菌及耐药性[7]PirainoB，Bail

2、leGR，BemardiniJ，eta1．Peritonealdialysis分析[J]．肾脏病与透析肾移植杂志，2009，18(6)：533—536．relatedinfectionsrecommendations：2005updme[J]．Perit[14]吕鹏．腹膜透析相关腹膜炎致病菌及耐药性分析(附65例DialInt，2005，25(2)：107-131．报告)[J]．中国现代药物应用，2012，6(1)：82—83．[8]刘鸿，余理智，戴光明．腹膜透析腹膜炎致病菌的耐药性分[15]李靖，肖

3、琼，韩志武，等．腹膜透析相关性腹膜炎发病因素及析[J]．中华医院感染学杂志，2003，13(3)：280—281．耐药特征分析[J]．西南国防医药，2012，22(4)：378—380．[9]解晓珍，潘绍武，孔繁浩，等．1662份腹膜透析液检出的菌[16]黄承国．腹膜透析相关性腹膜炎临床分析[J]．中国实用医谱及其耐药状况[J]．中华医院感染学杂志，1996，6(4)：药，2010，5(24)：107—108．249-250．[17]唐勇，胡庆．腹膜透析相关性腹膜炎治疗体会[J]．华西医[10]朱红军

4、，柯永坚，黄江玲，等．离心法腹膜透析液的培养及其学，2009，24(7)：1755—1756．病原菌分析[J]．实用医学杂志，2011，27(6)：1086—1087．[18]王秀芬，甘红兵，汪涛．腹膜透析相关性腹膜炎的临床分析[11]陈芳，董骏武，熊飞．培养阴性腹膜透析相关性腹膜炎的预[J]．医师进修杂志，2003，26(12)：17—18．后探讨[J]．中国中西医结合肾病杂志，2011，12(6)：519—(收稿：2013—06—24编辑：王耀东)3种方法提取外周血DNA比较分析范俊丽郑芳付小曼彭

5、春艳李聪摘要目的：比较PK法、KAc法和NaI法提取外周血DNA的差异．帮助临床研究选择更合适的DNA提取方法。方法：分别用3种方法提取外周血DNA，比较各方法时耗、花费、标本量及提取DNA的浓度、纯度等因素，方法间差异采用非参数检验(秩和检验)。结果：PK法和KAc法获得DNA浓度无统计学差异，纯度上PK法更好。但KAc法耗时更短，且成本更低，更安全；NaI法提取DNA纯度不高，但耗时最短，也可小样本提取DNA。结论：从安全性、耗时、标本量及提取质量等方面比较，KAc法是较好的DNA提取方法；NaI

6、法可用于快速提取关键词PK法；KAc法：NaI法；DNADNA是一类带有遗传信息的生物大分子，普取2份DNA样本。最终获得60份DNA样本。遍存在于各种细胞中。这些遗传信息不断从亲代1．2试剂1×红细胞裂解液：1×细胞核裂解液遗传到子代，决定子代的遗传性状。因为DNA的①(pH8．22mol／LTris—HCI，0．5mL；4mol／LNaC1，这一特性，对DNA的研究广泛应用于各个领域，10．0mL；2mmol／LEDTA，0．4mL；加dH2O至100包括疾病发生机制、诊断和治疗，新基因的分离，m

7、L)；10％SDS；20mg／mL蛋白酶K；饱和酚；酚／活性多肽、蛋白质和疫苗的生产等。随着技术的成氯仿(1：1V／V)；70％乙醇；1×细胞核裂解液②熟．对于DNA的研究也到越来越深人[。快速、经(10％SDS，5．0ml；5MNaC1，2．0mL；0．5mmol／L济地从外周血或组织中提取高产量、高纯度的EDTA，0．2mL；pH8．21mol／LTris—HC1，5．0mL；加DNA，对于疾病的分子水平研究非常重要。本研究dH2O至100mL)；PPS醋酸钾缓冲液(KAc，29．442g；主要是

8、对于实验室常用的3种方法：PK法、KAc冰醋酸，11．5mL；加dH20至100mL)；纯异丙醇；法和NaI法提取外周血DNA进行比较，旨在帮助37％异丙醇；6mol／LNaI溶液等。不同实验选择最合适的DNA提取方法。1．3DNA提取1材料与方法1．3．1PK法提取DNA[2-3]取1mL新鲜EDTA．1．1样本选择选取新鲜EDTA—Na抗凝静脉血Na抗凝血于10mL离心管中，加3倍体积的1×红10份，每份约5mL。每份血分别用3种方法各提细胞裂解液，