HPLC法与UPLC法同时测定黄芩中5种黄酮类成分含量的比较.pdf

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1、·中药分析与鉴定·HPLC法与UPLC法同时测定黄芩中5种黄酮类成分含量的比较△李化,刘静,董红敬,刘红亮,杨滨(1.中国中医科学院中药研究所,北京100700;2.成都中医药大学药学院,成都610075)中图分类号R284.1;R927.2文献标志码A文章编号1001.0408(2014)35.3293.04DOIi0.6039/j.issn.1001—0408.2014.35.10摘要目的:为黄芩多指标成分同步质量控制提供更加简便、快捷的检测方法。方法:分别采用高效液相色谱(HPLC)法和超高效液相色谱(UPLC)法测定黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和千层纸素A含量,比较两

2、种方法的分离情况、线性关系、精密度、重复性、稳定性和加样回收率。HPLC法色谱柱为DiamonsilC(250mmx4.6ImTl,5gm),流动相为乙腈.水.甲酸(梯度洗脱),柱温为30℃,流速为1.0ml/min,检测波长为280nln;UPLC法色谱柱为AquityBEHC(50mmx2.1nln3,1.7gm),流动相为0.1%甲酸水溶液一乙腈(梯度洗脱),柱温为4O℃,流速为0.4ml/min,检测波长为280nln。结果:两种方法在各自对应条件下的分离情况良好;进样量与峰面积积分值均呈良好的线性关系(r≥0.9995);精密度、稳定性和重复性试验RSD<4%;平均加样回收率均

3、>96%(RSD<5%,=6);样品测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论:UPLC法较HPLC法具有速度更快、灵敏度更高,且节省溶剂的优势。UPLC法可以成功代替HPLC法,应用于黄芩药材多指标成分的同步质量控制。关键词黄芩;黄酮类成分;含量测定;高效液相色谱法;超高效液相色谱法ComparisonofHPLCandUPLCfortheDeterminationof5FlavonoidsinScutellariabaicalensisLIHua,LIUJing2DONGHong~ing,LIUHong—liang,YANGBin(1.InstituteofChineseMate

4、riaMedica,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100700,China;2.CollegeofPharmacy,ChengduUniversityofTCM,Chengdu610075,China)ABSTRACToBJECTIVE:Toprovidesimpleandemcientmethodforthequalitycon~olofmultipiecomponetsinScutellariabaicalensis.METHODS:’HPLCandUPLCmethodwereestablishedtodeterminethe

5、contentsofbaicalin,wogonoside,baicalein,wogoninandoroxylinAinbaicalensis.Theseparation,linearrelationship,precision,reproducibility,stabilityandrecovery.werecomparedbetween2methods.ForHPLCsystem,DiamonsilC18(250inlnx4.6innl,5gm)columnwasappliedwithmobilephaseconsistedofacetonitrile—water-formicac

6、id(gradientelution)attheflowrateof1.0ml/min.Thecolumntemperaturewas30℃,anddetectionwavelengthwassetat280nln.ForUPLCsystem,AcquityBEHC18(50inlnx2.1mln,1.7gm)columnwasappliedwimmobilephaseconsisted0f0.1%formicacid.acetonitrile(gradientelution)attheflowrate0fO.4ml/min.Thecolunmtemperaturewassetat40o

7、C.anddetectionwavelengthwasset280nn1.ISU【S:Bothmethodshadgoodlinearrelationshipinsamplesizeandpeakarea(r≥0.9995);RSDsofprecision,stabilityandreproducibilitytestswerelowerthan4%;averagerecoverywashigherthan96%(RSD<5%.n=

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