丹参多糖提取影响因素研究.pdf

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1、·762·山东中医杂志2014年9月第33卷第9期·中药园地·丹参多糖提取影响因素研究包华音，刘杨，李巧玉，李峰(山东中医药大学，山东济南250355)[摘要]目的：考察不同提取方式和不同因素水平对丹参多糖提取率的影响，优化丹参药材多糖提取工艺。方法：采用苯酚一硫酸比色法，以丹参药材多糖提取率为评价指标，采用单因素实验设计，考察提取方式、料液比、醇沉浓度、提取时间对丹参多糖提取率的影响。结果：回流提取方式的丹参多糖得率显著高于超声提取方式。料液比为1：20时丹参多糖提取率最高，醇沉浓度以70％效果最好，提取时间以提取70min时得到的多

2、糖量最高。结论：不同提取方式和不同因素水平对丹参药材多糖提取率有显著影响。[关键词]丹参；丹参多糖；苯酚一硫酸法；回流提取；提取工艺[中图分类号]R256．22[文献标志码]A[文章编号]0257—358X(2014)09—0762—03丹参(SalviamiltiorrhizaBge．)为唇形科植物，Bge．)的干燥根，研磨成细粉，过四号筛。以根部人药，味苦，性微寒，具有活血化瘀、通经止4方法与结果痛、清热安神的功效[1]。药理研究表明，丹参多糖对4．1标准曲线的绘制对照品溶液的制备：精确称小鼠淋巴细胞增殖反应有着显著的促进作用，具有

3、取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品100mg．较好的免疫调节保护活性E21。本研究以丹参多糖得加水适量使其溶解并定容至100mL，混匀，得对照率为指标，比较了超声和回流两种提取方式对丹参品溶液(葡萄糖浓度为1．0000Izg·mL)显色剂的多糖得率的影响，并用单因素考察法确定料液比、提配制：将分析纯苯酚重蒸，收集180cI二馏分，取重蒸取时间、醇沉浓度对丹参多糖得率的影响，为本课题苯酚80g，溶于20mL蒸馏水中，配成80％苯酚，于后续丹参药材多糖提取工艺的进一步优化研究和丹棕色瓶中4℃保存，临用前加蒸馏水稀释成6％苯参药材的质量评

4、价奠定基础。酚。最大吸收波长的测定：精密量取3mL对照品溶1仪器液，稀释至10mL，后取2．0mL于洁净试管中，加入CP225D型十万分之一电子天平(上海越平科学6％苯酚1．0mL，混匀。迅速加入浓硫酸5．0mL混匀，仪器有限公司)：紫外一可见分光光度计(uv一9000型．放置5rain。将试管于沸水浴中加热15rain，取出冷上海云析仪器有限公司)；恒温水浴锅(SL型，上海至室温；另精密量取蒸馏水2．0mL，同法操作作为空树立仪器仪表有限公司)；医用离心机(TL-1型，姜白对照，待测溶液用紫外一可见分光光度计200～堰市天力医疗器械有

5、限公司)；数显式电热恒温干燥800nm扫描测试，选择葡萄糖有最大吸收的490nm箱(101一OA型，上海佰奥生物科技有限公司)；超声为测定波长。标准曲线的绘制：依次精密吸取对照品波清洗器(KQ2200，昆山市超声仪器有限公司)；冰溶液0、20、40、60、80、100L于试管中，加水补至箱(BCD一215TBDZ，青岛海尔)。2．0mL。采用苯酚一硫酸法在490nm波长处测定，以2试剂第1支试管中的溶液为空白对照。按照分光光度法D一葡萄糖(中国药品生物制品检定所，批号：(《中国药典)2010年版一部附录VA)，测定其余5l10支试管中溶

6、液的吸光度。以葡萄糖浓度(g·mL)为833—200302)。无水氯化钙、浓硫酸、重蒸苯酚、氯仿、横坐标，吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得到无水乙醇、正丁醇均为分析纯，水为双蒸水。的线性回归方程为：Y=0．0162X一0．0034(r=O．9991)．3药材线性范围为0～100g。所用药材均经鉴定为丹参(Salviamiltiorrhiza4．2精密度实验精密吸取对照品溶液40L于试管中，加水补至2．0mL，采用苯酚一硫酸法在490nm[收稿日期]2013—11—4测定吸光度，重复测定6次，计算吸光度A的RSD=[基金项目]山东省

7、农业良种工程重大课题(编号：2011LZ01—03)，山东省自然科学基金(编号：ZR2011CQ045)0．98％(n=6)，表明仪器精密度良好。[作者简介]包华音(1979一)，女，山东荣成人，讲师，博士研究生4．3多糖提取方式的比较称取丹参药材粉末6在读，主要从事中药质量控制与资源研究。份，各1．000g。向其中一份中加入30mL蒸馏水，称[通信作者]李峰(1957一)．男，山东安丘人．博士研究生导师，教授，从事中药质量控制研究。E—mail：lifeng@studcm．edu．cn定重量。超声提取30rain，称定重量并补足失重山

8、东中医杂志2014年9月第33卷第9期·763·4000rpm离心5min，吸取上清液，将其浓缩至25mL，作为超声待测提取液。向另一份粉末中加入30mL蒸馏水。加热回流提取1．5h，冷至室温，4000rp