稀释培养法测定水中生化需氧量.doc

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1、稀释培养法测定水中生化需氧量一、实验目的掌握稀释培养法测定牛化需氧量的原理、方法和操作技术，学会五口生化需氧量的测定原理和操作技术；了解生化需氧量测定的意义和采样方法。实验原理生化需氧量是指在好氧条件下，微生物分解存在水屮的有机物质的生物化学过程屮所需的溶解氧量。根据参加反应的物质和最终生成的物质，可用下列的反应式来概插生物化学反应过程：6CJLA+1602+4NH3—>4C5H702N+16C02+28H20co2+h2o+xh3+o2微生物有机污染物微生物分解有机物是一个缓慢的过程，要把可分解的有机物全部分解掉常需要20d以上的吋间，微生物的活动与温度有关，所以测定生化需氧

2、量吋，常以20C作为测定的标准温度。一•般来说，在第5天消耗的氧量大约是总需氧量的70%,为便于测定，1=1前普遍采用20C培养5d所需溶解氧含量作为指标，单位以的吨/L表示，简称B0D5。用碘量法测定未经培养的各份稀释比的水样和空白水样屮的剩余溶解氧。用同样方法测定经培养5d后，各份稀释水样和溶解水样屮的剩余溶解氧。Mn"+2OH—Mn(OH)22Mn(OH)2+。2一2Mn6+2HoOMnO2+2l+4H—M1?'+卜+2比02S2O32+】2fS4O6*+2I一莫耳氧分子消耗四莫耳硫代硫酸鈿生化需氧量是指在好氧条件下，微生物分解存在水屮的有机物质的生物化学过程屮所需的溶解

3、氧量。根据参加反应的物质和最终生成的物质，可用下列的反应式来概插生物化学反应过程：6CJLA+1602+4NH3—>4C5H702N+16C02+28H20co2+h2o+xh3+o2微生物有机污染物微生物分解有机物是一个缓慢的过程，要把可分解的有机物全部分解掉常需要20d以上的吋间，微生物的活动与温度有关，所以测定生化需氧量吋，常以20C作为测定的标准温度。一•般来说，在第5天消耗的氧量大约是总需氧量的70%,为便于测定，1=1前普遍采用20C培养5d所需溶解氧含量作为指标，单位以的吨/L表示，简称B0D5。用碘量法测定未经培养的各份稀释比的水样和空白水样屮的剩余溶解氧。用同

4、样方法测定经培养5d后，各份稀释水样和溶解水样屮的剩余溶解氧。Mn"+2OH—Mn(OH)22Mn(OH)2+。2一2Mn6+2HoOMnO2+2l+4H—M1?'+卜+2比02S2O32+】2fS4O6*+2I一莫耳氧分子消耗四莫耳硫代硫酸鈿io3"+5F+6H->3b+3H「03【2+6S2O32->6r+3S4O62*1mmoleKH（1O3）2=12inmoleSO”4*J硫代硫酸纳莫耳濃度（M）=!jxMN,“4=碘酸氫鉀標準液濃度（“）»4=碘酸饥鉀標準液之體積（mL）V3=硫代硫酸鋪滴定溶液之消耗體積（mL）三、儀器與試劑恒温培养箱[（20+1）°C]o20L细口

5、玻璃瓶。1000-2000mL量筒。特制搅拌棒，在玻璃下端安装一个2俪厚，大小和量筒相匹配的有孔橡皮片。250"300mL碘量瓶，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。虹吸管,供分取水样和添加稀释水用。四、操作步骤1•培养将各稀督比的水样，稀释水（或接种稀释水）空白各取一瓶放入20±l°C的培养箱内培养5d,培养过程小需每天添加封口水。2.用碘量法测定未经培养的各份稀释比的水样和空白水样屮的剩余溶解氧。用同样方法测定经培养5d后，各份稀释水样和溶解水样小的剩余溶解氧。3.硫代硫酸钠溶液标定：在三角瓶內溶解約2克不含碘酸鹽的碘化鉀與100至150ml試劑水，加入lml3M硫酸或數

6、滴濃硫酸溶液及20.00ml碘酸氫鉀標準溶液，以試劑水稀釋至約200ml,隨即以硫代硫酸钠溶液滴定所釋放出的碘，在接近滴定終點時候，加入澱粉指示劑，繼續滴定至藍色消失，採用兩次平均值且兩次滴定體積不得超過0.lmlo4.在裝滿水樣的BOD瓶中,先加入lml硫酸亞鎰溶液,再加入lml鹼性碘化物-疊氮化纳溶液，加試劑時移液管應伸入水面或尖端剛好在水面上緩緩加入。5.小心加蓋，五一六氣泡，上下倒置B0D瓶數次，使其混合均勻。待沉澱物下沉至半瓶位置，打開瓶蓋，加入lml濃硫酸，加蓋后在丄下倒置BOD瓶數次，直至沉澱完全溶解。6.由BOD瓶屮取適量水樣至適當容器內，標定過程的硫代硫酸鋪滴

7、定至淡黃色,加幾滴澱粉指示劑，繼續滴定至第一次藍色消失為滴定終點。若超過滴定終點，对用碘酸氫鉀溶液反滴定，或再加入一定髏積的水樣繼續滴定。五、数据处理1.溶氧量：按公式(2)计算溶解氧的含虽:(2)(3).Cxre^8xlOoo：2人(3)中:p()：—水样中溶解氧的浓度，mg/L：力一固定水样总体积(水样瓶的容积)，mL：V2—采样时加入水样瓶内的溶解氧固定剂的体积，mL；V,—滴定所用去的硫代硫酸钠标准溶液体积，mL：C—硫代硫酸钠标准溶液的浓度。mol/L：V-——滴定时所取固定水样的