玉米肽对小鼠酒精性肝损伤的保护机制研究

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1、■_ACADEMICFORUM■一玉米肽对小鼠酒精性肝损伤的保护机制研究●李培培朱学良杨国燕陈栋梁1武汉天天好生物制品有限公司2武汉肽类物质研究所摘要：为了研究玉米肽对酒精性肝损伤的作用机制，本研究以无水乙醇制造急性酒精性肝损伤模型，观察玉米肽对小鼠酒精性肝损伤的保护作用。结果表明：玉米肽能显著降低酒精性肝损伤模型小鼠血清AKP、ALT、AST的活性以及胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量；降低肝组织MDA的含量，显著提高肝脏GSH的含量和抗氧化酶SOD、GST、CAT的活性，改善肝组织损伤程度。由此可知，玉米肽可显著降低乙醇对肝脏的损伤，对酒精性肝损伤有明显

2、的保护作用。关键词：酒精性肝损伤玉米肽小鼠保护作用1前言实验用AKP、ALT、AST、TC、TG、MDA、GSH、T—AOC、生物活性肽是蛋白质经过特征酶或生物降解后产生的、SOD、GST、CAT试剂盒：均为南京建成生物工程研究所具有显著的生物学活性、且由数个至数十个氨基酸组成的肽类产品。混合物，即蛋白水解产物。它具有活性高、分子量小、消化吸2．3主要仪器收快和安全性高的特点，因而越来越受到人们的普遍关注。玉754紫外可见分光光度计，上海菁华科技仪器有限公司；米蛋白经酶处理后制备的活性肽，可促进酒精代谢，减少暴饮高速离心机，上海医用分析仪器厂；数显恒温水浴箱，国

3、华电引起急性酒精中毒的发生率。因其含有的丙氨酸对减轻麻醉、器有限公司；分析天平，上海海康电子仪器厂。防止酒醉有良好效果，故又称醒酒肽⋯。玉米蛋白活性肽不仅3实验方法具有解酒、降血压、保肝护肝、抗高胆固醇、促进脂肪代谢、3．1动物分组、造模及给药延缓衰老、增强免疫功能等作用，且营养性、安全性高，原料参照文献方法，实验小鼠饲养环境25～27℃，适应性喂养3丰富，应用前景广阔[21。本研究通过制造急性酒精肝损伤模d后，随机平分为6组，按表1所示剂量灌胃给药，每日1次，连续型，观察玉米蛋白活性肽对小鼠血清及肝匀浆组织的影响，分30d，对照组和模型组给予蒸馏水，体积均为2

4、0mI_Jkg。实验结束析其对急性酒精性肝损伤的保护作用，为玉米蛋白活性肽的进时除正常组外其余各组均1次灌胃给予50％乙醇(12mL／kg)，正常一步开发应用提供理论基础和实验依据。对照组给予蒸馏水，禁食16h后处死动物。2材料、试剂与仪器3．2组织和血液样本的采集和处理2．1材料实验结束后，禁食16h，眼球采血，静置1h后，1,000r／min玉米蛋白活性肽：由武汉天天好生物制品有限公司制备，离心10rain，分离血清，一20℃冷冻储存备测。多肽含量在70％以上，实验前用蒸馏水配制成0．5％、1．0％、采血完毕后小鼠迅速颈椎脱臼致死，解剖取出肝脏，生理2．0％

5、的溶液，用作低、中、高3个剂量组灌胃，置4℃冰箱盐水漂洗血迹，滤纸沥干，一80℃冷冻保存备用。保存备用。葵花牌护肝片：黑龙江葵花药业股份公司生产，实3．3指标及测定方法验前用蒸馏水配制成10％的溶液，置4℃冰箱保存备用。ICR小鼠6O只，雄性，清洁级，体重22～25g，购买于3．3．1玉米肽对小鼠血清的影响湖北省实验动物研究中心。小鼠饲料成分：玉米，豆粕，四号检测血清中AKP、ALT、AST的酶活性以及TC、TG粉，微量元素等。的含量，均按试剂盒说明操作。2．2试剂3．3．2玉米肽对小鼠肝匀浆的影响取肝脏用0．85％的生理盐水冰浴匀浆，3，000r／min离心作

6、者简介：李培培(1985一)，女，实习研究员，硕士，研究方向：生物活性10min取上清液制成10％肝匀浆，按试剂盒说明操作检测肝肽功能及其应用研究。组织中MDA、GSH的含量，以及T—AOC、SOD、GST、CAT术通讯作者：陈栋梁(1962一)，男，研究员，博士，主要从事生物活性的活性，考马斯亮蓝法测定肝匀浆蛋白含量。肽的生物化学、生理学及其应用研究。CF!(1O)OCT201O饕薯■霪曩■ACADEMlCFORUM3．4数据处理与统计分析模型对照组比较，玉米肽3种剂量组对小鼠血清AKP、ALT、采用SPSS16．0软件包，多组均数进行方差齐性检验和单因AST

7、活性升高均有抑制作用，表明玉米肽能抑制酒精引起的素方差分析(one—wayANOVA)，各组间差异比较采用LSD法。血清中AKP、ALT、AST的上升，减轻小鼠肝细胞的损伤程4结果与分析度，从而保护细胞膜的完整性。高剂量实验组与阳性对照组的4．1玉米肽对小鼠血清各指标的影响保肝作用较明显。ALT主要存在于肝细胞浆内，当肝细胞损伤时，细胞内从表2可知，与正常组相比，模型组TC、TG含量值均转氨酶可进入血中，引起血ALT升高。AST也存在于肝细胞有极显著性差异(p<0．01)，说明造模成功，酒精能明显增高浆内，AST并分布于线粒体内，当肝细胞损害严重时，线粒体小鼠血

8、清胆固醇(TC)和甘油三