豆粕发酵过程中乳酸检测方法的选择及含量变化的研究-论文.pdf

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1、J、‘东饲料第23卷第3期2014年3月豆粕发酵过程中乳酸检测方法的选择及含量变化的研究郭子好方华夏志生朱校适孙中超俞涵丽夏佳吉(上海源耀生物股份有限公司，上海浦东201316)[中图(f~-g-]8816．7【文献标识码】A[：~g-]]005—8613(2014)03—0040—02[摘要]发酵豆粕中乳酸含量的检测方法一般使用碱滴定法，该方法检测的是总酸的含量，但不能准确测定发酵豆粕中乳酸的含量。本实验通过对比碱滴定法与高效液相色谱法检测发酵豆粕中乳酸的含量，结果表明使用高效液相色谱方法检测乳酸含

2、量较为稳定、准确。同时，本文检测了豆粕在发酵过程中乳酸含量的变化，豆粕在发酵前乳酸含量极低，几乎检测不到；加入菌种后检测乳酸含量占物料的2．50％；经48h发酵结束后检测乳酸含量占物料的5．16％；发酵豆粕经干燥粉碎后乳酸含量占物料的8．96％。[关键词]发酵豆粕；乳酸；液相色谱法；碱滴定法；含量变化发酵豆粕是以优质豆粕为主要原料，在多菌种该标准方法用于测定饲料中人工加入的乳酸含量混合发酵下，将豆粕中的多种抗营养因子去除，同时效果较好，但不适合发酵豆粕中乳酸的检测。原时其在发酵过程中产生大量对动物有益

3、的菌种、乳因是豆粕进行发酵后，产生许多小分子有机酸，对酸等物质，是一种优质的多功能饲料蛋白。乳酸的检测造成干扰，使乳酸的色谱检测时出峰不豆粕在发酵过程中产生多种有机酸，乳酸是其稳定且混有杂峰，无法很好地判断乳酸的出峰。我中最多的一种有机酸。目前测定发酵豆粕中乳酸含们实验室通过改变流动相，流速等条件，确定了检测量的方法基本上都是碱滴定法，它存在许多的问发酵豆粕中乳酸含量的液相色谱方法，该方法使用题。首先，它滴定的是总酸的含量，而不单是乳酸的普通C18色谱柱(54．6mm×250mm)，柱温：35含量。其

4、次，发酵豆粕中存在一些其他弱酸影响滴℃；检测波长：210nm；进样量：20L；流速：0．8定结果，同时，滴定的终点以颜色来判断，存在滴定mL／min；流动相：乙腈+pH2．0磷酸溶液=3：97不完全和滴定过量的情况，难以准确定量。第三，发(体积比)。酵豆粕在干燥过程中会有部分有机酸蒸发损失，还2豆粕发酵过程中乳酸含量变化会有部分有机酸和其他物质结合形成盐类物质等，为准确地确定豆粕在发酵过程中乳酸含量的比如乳酸和一些盐类物质生产乳酸盐，乳酸盐在滴变化，我们特地跟踪了一批次上海源耀生物股份有定过程中是无法

5、定量的，但乳酸盐在进人动物体内限公司的豆粕发酵生产过程，具体检测参数如下。仍然具有乳酸的功能，也就是说滴定确定的乳酸的2．1豆粕中乳酸的含量量是不准确的。所以，想要准确测定发酵豆粕中乳首先对要进行发酵的豆粕进行乳酸含量的检酸的含量，需要寻找一种代替滴定法的检测方法。测。豆粕中水分占12．55％，乳酸含量为1．35mg／kg，1检测方法的确定占豆粕含量的0．00014％，基本上可以认为豆粕中国家有关部门于2009年制定了使用高效液相不含有乳酸。色谱法检测饲料中乳酸含量的国家标准GB／T23877。2．2

6、菌种和豆粕混合后乳酸含量发酵豆粕的菌种为混合菌种，其中含有大量的[收稿日~]]2014—1—17乳酸菌，乳酸菌在菌种培养过程中产生大量的乳·40·广东饲料第23卷第3期2014年3月表1各物质中乳酸所占比例酸，菌种刚与豆粕混合还未进行发酵时，取样检测粕发酵的菌种中有一些酵母菌，酵母菌能够合成一水分为53．22％，乳酸含量为25025．13mg／kg，占物些乙醇，乳酸和乙醇在一定条件下生成了乳酸乙料的2．50％。使用滴定法对该样进行滴定结果是乳酯，这可能也是乳酸损失的一个原因；发酵豆粕干酸含量占物料的2

7、．41％。燥时产生的滤液经高效液相色谱分析其含有较低2．3豆粕经过48h发酵后乳酸含量的乳酸含量，乳酸在加热烘干过程中会和其他物质豆粕经48h发酵结束后，取样进行检测，检测反应或是小部分挥发，也会导致部分乳酸丢失。结果水分占物料53．04％，乳酸含量为51618．85高效液相色谱法和普通碱滴定法造成乳酸在mg／kg，占物料的5．16％。使用滴定法对该样进行滴检测上的差异主要原因是什么?查询大量的文献，定结果是乳酸含量占物料的2．63％。并请教有经验的学者，我们推测造成乳酸差异的主2．4发酵豆粕干燥后但

8、未进行粉碎时乳酸含量要原因是乳酸在豆粕发酵过程中以及发酵豆粕在豆粕发酵好后进行干燥，干燥后再进行粉碎干燥过程中部分和盐类物质反应生成了乳酸盐，乳前进行取样，样品检测结果为水分占物料14．7％，酸盐物质呈弱碱性，普通的碱滴定法无法滴定其乳乳酸含量为82696．32mg／kg，占物料的8．26％。使酸含量，而乳酸液相色谱法使用的流动相是pH2．0用滴定法对此样进行滴定结果是乳酸含量占物料的磷酸溶液，乳酸盐物质经过该流动相时可以检测的3．4％。出乳酸含量。我们