鸡新城疫卵黄抗体提取方法筛选研究.pdf

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1、本栏目主要介绍药物的对桌一疾病的临床疗效，或者和另外一种药物的防治比较试验，欢迎来稿。E—mai：sysc．zn@163．corn鸡新城疫卵黄抗体提取方法筛选研究刘瑞生张洪波薛掌林张述斌王必惠甘肃省畜牧兽医研究所卵黄抗体(IgY)是指禽类(鸡、鸭、鹅)卵黄中存在的抗的氯仿法、苯酚法和辛酸法进行了鸡新城疫卵黄抗体提取体，也称卵黄免疫球蛋白，是应用特异抗原免疫禽类以后，方法的比较研究。、从含高效价的禽蛋黄中提取的一种生物制品。卵黄抗体具一、材料与方法有凝集细菌、中和病毒等功能，均一性好，对热、酸和碱稳1．材料定性好，产

2、量高，成本低等利于生产、产生有效免疫反应所化学药品苯酚：天津市新华化学厂生产；正辛酸：上需抗原量小、免疫检测时有较高的敏感性、无副作用、性质海永华特种试剂厂生产；氯仿(三氯甲烷)：天津市百世化稳定等优点，因此在动物疾病诊断、防治上具有重要作用，工有限公司生产。特别在病毒病防治方面具有广阔的应用开发前景。对卵黄免疫疫苗鸡新城疫Lasota疫苗、鸡新城疫油乳剂灭抗体的研究与应用引起了人们的极大兴趣，近年来对其研活疫苗：黑龙江省生物制品一厂生产。究越来越多，认识也越来越深入。郑厚旌等(1992)应用自鸡蛋实验室饲养的产蛋

3、鸡，分别采用鸡新城疫制的双价高免卵黄抗体1只份(ma／只)使用1次，预防IBDLasota疫苗肌肉注射0．5ml／只免疫1次，鸡新城疫油乳剂的保护率达100％，用于治疗本病的疗效达87．25％；用于灭活疫苗免疫2次，每次肌肉注射o．5ml／只，每次免疫间ND的预防，保护率达75％一80％，治疗本病的疗效达70％。隔1周时间，最后1次免疫后2周收集鸡蛋备用。汪丽等(1999)采用研制的IBD-ND双联冻干抗体实验室2．卵黄抗体的提取方法治疗有效率IBD为70％一90％，ND为60％-80％；现地治将收集的鸡蛋用清水洗

4、净，百毒杀消毒液中浸泡疗有效率为80．47％，预防保护率为96．8％。高云英等(2003)15min，取出后清水中冲洗晾干，在无菌室内打开蛋壳，分应用仔猪大肠杆菌标准菌株和地方分离菌株免疫商品蛋离蛋清与蛋黄，除去蛋清和卵黄膜，收集蛋黄盛于灭菌容鸡制备多价卵黄抗体，经预防、攻毒试验及临床治疗效果器内，搅拌均匀，然后分别采用下面3种方法提取卵黄抗观察，对仔猪免疫保护率可达90％以上，攻毒保护率98％体，先后提取2次。以上，临床治愈率95％以上。张桂枝等(2009)用新城疫疫氯仿提取法量取100ml卵黄液，将卵黄液、氯仿

5、、生苗和传染性法氏囊病疫苗免疫健康高产蛋鸡制备抗鸡新理盐水按1：1：2比例混合均匀后静置30nfin，用离心机以城疫和传染性法氏囊病二联卵黄抗体，在40个规模化肉3000r／rain离心30min，收集上清液并用量筒量取容量。即鸡场推广应用果表明，预防保护率达100％，治愈率为63％为提取的卵黄抗体。-85％。崔焕忠等(2012)制备猪繁殖与呼吸综合征病毒高免苯酚法量取100ml卵黄液，将卵黄液和2％的苯酚卵黄抗体，人工感染治愈率和临床应用治愈率分别为溶液以1：3的比例混合均匀，静置30rain，再用离心机离心10

6、0％和89．1％，表明制备的卵黄抗体对猪繁殖与呼吸综合30rain，收集上清液，并用量筒量取容量。征具有显着的治疗效果。刘绍琼等(2013)研究显示，卵黄辛酸法量取100ml卵黄液，将其和pH为4．5的醋可代替血清样品用ELISA检测试剂盒检测，以判断种鸡群酸盐缓冲液按1：2的比例混合均匀，加入一定量辛酸(占卵的病原感染状态。目前文献报道的卵黄抗体提取方法有氯仿法、苯酚法和辛酸法等，提取效果各不相同。为了选择一种提取产量高，效价好，方法简便的提取方法，对文献报道用13一微量血凝抑制试验测定三种不同方法提取的p主要有

7、沉淀法、层析法、超滤法、抽提法和反复冻融法。路黄抗体效价。等学等(2000)对抗鸡新城疫ND、大肠杆菌病、副伤寒三联二、结果血清抗体和抗鸡新城疫高免卵黄抗体进行了提纯工艺研1．不同方法提取的卵黄抗体物理性质究，提纯血清抗体效价新城疫HI≥121og2，大肠杆菌凝集不同提取方法由于加入的化学试剂不同，其物理性质素凝集价达1：1024，沙门氏菌凝集素凝集价为1：512；提纯不尽相同。通过观察发现，采用氯仿法、苯酚法和辛酸法三抗体通过了无菌检验，安全检验和鸡体中和试验，临床初种不同方法提取的卵黄抗体，均为澄清透明的液体，

8、颜色步用于治疗非典型性鸡新城疫，发病初期治愈率为88％。略有不同，分别为淡黄色、无色或淡黄色和淡黄色。在气味穆海波等(2003)从高免卵黄中分离提纯的特异性新城疫方面差别较大，用鼻子闻气味，可分别闻到轻微氯仿味、苯抗体，对新城疫病毒具有明显的中和作用，中和指数较高。酚味和辛酸味，带有各自提取药剂的特征性气味。结果见吴周良等(2005)用辛酸一硫酸铵盐析法从经