胰岛素联合顺铂对人宫颈癌细胞株HeLa生长的影响.pdf

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1、中华临床医师杂f电子版)2013年7月第7卷第l4期ChinJClinicians}fElectronicEdition)，Julv15，2013．、b1．7．No．】4·153·基础论著胰岛素联合顺铂对人宫颈癌细胞株HeLa生长的影响赵婷张蓓【摘要】目的观察胰岛素(INs)联合顺铂(DDP)对人宫颈癌HeLa细胞生长及凋亡的影响，并初步探讨其作用机制。方法体外培养的人宫颈癌细胞株(HeLa)经INS、DDP单独或联合作用后，MTT检测细胞增殖抑制情况；AnnexinV-FITC双染流式细胞术分析细胞凋亡；流式细胞仪检测不同加药处理组的细胞周期时

2、相变化情况；Westemblot印迹方法检测细胞中JNK2、p-JNK2及caspase．3蛋白的表达情况。结果MTT结果显示：INS无抑制细胞增殖作用，DDP单药组与联合用药组均能抑制细胞的增殖，两药联合时细胞增殖抑制率明显高于DDP单药组，差异有统计学意义(0．000)，细胞凋亡结果显示：INS无促细胞凋亡的作用，联合用药组的细胞凋亡率明显高于DDP单药组(l<0．01)。细胞周期结果显示：DDP、INS单药均能促进细胞由G1期向S期转变；联合用药组HeLa细胞S期比例增加更加明显，与DDP组相比，差异有统计学意义(l<0．05)。Weste

3、mblot结果显示：实验组与对照组比较，JNK2蛋白水平无明显变化，PJNK2、caspase．3于DDP组及DDP+INS组中表达增加，联合用药时增加更为明显，与DDP组相比，差异有统计学意义(户l<0．05)，而在INS组中三种蛋白表达变化均不明显。结论INS可增强DDP对宫颈癌HeLa细胞的毒性作用，其机制可能与协同DDP促进细胞由GO期步入S期，上调P．JNK2及caspase．3蛋白表达有关。【关键词】胰岛素：顺铂；宫颈肿瘤；HeLa细胞；药物疗法EnhancementofinsulinoncisplatinsensitivityofH

4、eLacervicalcancercelllineandthemechanismZHA0Ting,ZHANGBei．GraduateSchoolXuzhouMedicalCollege,Xuzhou221002,ChinaCorrespondingauthor：ZHANGBei,Email：bettyzhanglO@163．corn[Abstract]0bjectiveTostudytheefectandmechanismofcisplatin(DDP)aloneandincombinationwimInsulinupontheprolifera

5、tionandcellapoptosisofhumancervicalcancercellsHeLainvitro．MethodsCervicalcancercelllineHeLawasincubatedwith5U／LINS，7．26mg／LDDP,and5U／LINSfor6hfollowedby7．26mg／LDDECellproliferationwasdeterminedbyMTTassay．AnnexinV-FITC／PIdoublestainingflowcytometrywasusedtoanalyzeapoptosis．Flo

6、wcytometrywasusedtostudythecellcycledistilbutionoftheHeLacellsofeachgroup．TheexpressionofNK2，JNK2phosphorylafionandcaspase一3weredetectedbyWesternblot．ResultsTheinhibitingratesofcellstreatedwiththesingleDDP,andINSplusDDPfor12hwere(21．11±1．36)％，(48．06±2．66)％，respectively,theant

7、iproliferationefectofINScombinedwithDDPgroupwassuperiortosingleDDPgroup(P=O．ooo)，buttherewasnosignificantdiferencebetweenINSandcontrolgroup．INShadnosignificantapoptosis—promotingefect．ButthecombinedtreatmentgroupapoptosisratewassuperiortosingleDDPgroupfP<0．O1)．Flowcytometrysh

8、owedinsulincanincreasetheSphasearrestinducedbyDDEWesternblotanalysis