雷帕霉素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞生长和对HIF—lα与VEGF表达影响的观察-论文.pdf

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1、中华肿瘤防治杂志2013年7月第2,3卷第l4期CHINJCANCERPREVTREAT，July2013，Vo1．20No．14《实验研究／论著l雷帕霉素联合顺铂对官颈癌Hela细胞生长和对HIF—la与VEGF表达影响的观察吴洁玲韩璐杨丽肖。1．大连市妇产医院妇科，辽宁大连1160332．北京市房山区妇幼保健院妇产科，北京102488【摘要】目的：探讨mTOR抑制剂雷帕霉素与顺铂联合应用对宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及对HIF-1a和VEGF表达的影响。方法：分别以雷帕霉素、顺铂及雷帕霉素联合顺铂处理体外培养人宫颈癌Hela

2、细胞，采用MTT比色法检测人宫颈癌Hela细胞的抑制率，金氏公式评价两药联合用药的效果，采用RT—PCR法、蛋白质印迹法检测各组细胞HIF_1a和VEGFmRNA和蛋白的表达。结果：雷帕霉素和顺铂对宫颈癌Hela细胞的生长有明显的抑制作用，并呈剂量依赖性，分别联合应用2种浓度雷帕霉素(1O和20nmol／mL)与顺铂(0．25和0．5mg／mL)协同治疗指数口值均>1．15，两者有协同作用。雷帕霉素与顺铂联合用药HIF-1mRNA的表达为0．242±0．048，单独用药雷帕霉素组为0．428士0．068，顺铂组为0．357士0．05

3、1；雷帕霉素与顺铂联合用药组VEGFmRNA的表达为0．498土0．093，单独用药雷帕霉素组为0．651土0．112，顺铂组为0．623±0．125，联合用药组与单独用药组比较表达量明显降低，P

4、低，P<0．05。结论：单独及联合应用雷帕霉素与顺铂对宫颈癌Hela细胞的生长均有抑制作用，两药联合应用有明显的协同作用，雷帕霉素联合顺铂具有明显下调HIF_1a、VEGF基因和蛋白表达的作用。【关键词】雷帕霉素；顺铂；HIF_1a；VEGF；Hela细胞、中华肿瘤防治杂志，2013，20(14)；1075—1078EffectofrapamycincombinedwithcisplatinonthegrowthofHelacellsinvitroandtheexpression0fHIF．1aandVEGFWUJie-ling，H

5、ANLu，YANGLi—Xiao1．DepartmentofGynecologY，DalianObstetricsandGynecologyHospital，Dn￡nz口。，zg116033，P．R．China2．DepartmentofObstetric：；andGynecologyMaternalandChildHealthHospiotal，Fangshandistrict，Beijing102488，P．R．Cina[ABSTRACT]OBJECTIVE：Toeximinetheeffectofrapamycincombin

6、edwithcisplatinontheinhibitionofHelacellsinvitroandtheexpressionofHIF-1nandVEGF．METHODS：CervicalcarcinomaHelaeellweretreatedbyrapamycin，cispla—tin，rapamycinandcisplatinrespectively．TheinhibitoryeffectsofchemotherapyontheproliferationofHelacellweremeasuredwithMTTassay，a

7、ndthecombinedeffectofrapamycinandcisplatinwereevaluatedusingKing’sformula．TheexpressionsofmRNAandtheproteinoftheHIF_1dandVEGFweredetectedusingtranscription-polymerasechainreac—tion(RT—PcR)andWesternBlot．RESULTS：Bothrapamycinandcisplatinshowedinhibitoryeffectonprolifera

8、tionofHe—lacellsandwithdose-dependenceintwoconcentrationsofrapamycin(10and20nmol／mL)andcisplatin(0．25andO．5mg／mL)resp