黄芪注射液联合顺铂对hela细胞生长的影响

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1、湖北中医药大学学位论文原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：名铱沈密如B年厂月乡。日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布

2、学位论文的全部或部份内容，可以采用复印、缩印或其他手段保留学位论文；学校可以根据国家或湖北省有关部门的规定送交学位论文。(保密论文在解密后遵守此规定)论文作者签名：编乏喜导师签名：确M妒§"口日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IAbstract···········································································】[I：【英文缩略词列表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯VI前言⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯

3、⋯01刚百⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯”U上正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯02一、实验材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯021细胞株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯022药物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯023主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯024主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯035实验用试剂的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯03二、实验方法1细胞复苏⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯052细胞传代培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯053细胞冻存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯064细胞计数⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯065MTT法检测黄芪注射液对HeLa细胞生长的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯066流式细胞仪检测细胞凋亡率⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯067蛋白含量测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯078Westernblot检测Bax、p53、Bcl一2的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯079统计学处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯08三、结果1黄

5、芪注射液对HeLa细胞的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯082流式细胞仪检测细胞凋亡率⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯083Westernblot检测Bax、p53、Bcl一2的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯09四、讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯093484～献～一～～文一～语考录述谢结参附综致中文摘要目的：研究不同浓度黄芪注射液单独或联合顺铂对HeLa细胞生长的影响，并初步探讨其影响机制。方法：单独或联合应用不同浓度的黄芪注射液、顺铂作用于人宫颈癌HeLa细胞系，采用3一(4，5一二甲基噻唑一2)一2，5一二苯基四氮唑溴盐(MTT)

6、法检测对细胞生长的影响，流式细胞仪检测细胞凋亡率，Westernblot检测凋亡相关蛋白p53、Bax、Bcl-2的表达。结果：1．MTT法检测对细胞生长的影响：(1)不同浓度黄芪组与对照组比较：24h时黄芪高浓度组的光密度值低于对照组，黄芪低浓度组的光密度值高于对照组，差异均有统计学意义(尺0．05)，黄芪中浓度组的光密度值与对照组比较差异无统计学意义(／b0．05)。48h、72h时黄芪高浓度组、黄芪中浓度组的光密度值低于对照组，黄芪低浓度组的光密度值高于对照组，差异均有统计学意义(FO．05)。(2)不同浓度黄芪组之间比较：24h、48h、72

7、h时黄芪高浓度组的光密度值低于黄芪中浓度组、黄芪低浓度组，黄芪中浓度组的光密度值低于黄芪低浓度组，差异均有统计学意义(尺O．05)。最佳的黄芪作用浓度为10009·L～。(3)组内不同时间比较：①对照组：48h、72h时光密度值高于24h时，差异均有统计学意义(尺0．05)；48h时与72h时光密度值比较差异无统计学意义(乃O．05)。②黄芪高浓度组：48h、72h时光密度值低于24h时，差异均有统计学意义(尺O．05)；48h时与72h时光密度值比较差异无统计学意义(乃0．05)。从而最佳的黄芪作用时间为48h。③黄芪中浓度组：72h时光密度值低于

8、24h、48h时，差异均有统计学意义(只0．05)；48h时与24h时光密度值比较差异无统计学意义(／b0．