DDP对顺铂的敏感性-论文.pdf

《DDP对顺铂的敏感性-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、JSouthMedUniv,2013，33(12)：1727—1732doi10．3969~．issn．1673—4254．2013．12．04·工727·基础研究E2F．1基因沉默可增强人胃癌耐药细胞株SGC．7901／DDP对顺铂的敏感性廉超，杨杰，王晓通，谢玉波，肖强广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科，麻醉科，广西南宁530021摘要：目的探讨E2F转录因子1(E2Ftranscriptionfactor1，E2F．1)基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC．79O1／DDP对顺铂敏感性的影响及可能机制。方法将SGC．7901／DDP细胞接种

2、于六孔板，分为3组：以E2F．1沉默重组慢病毒颗粒(Lv—shRNA．E2F．1)感染SGC-7901／DDP，作为Lv．shRNA．E2F．1组；以阴性对照慢病毒颗粒(Lv．shRNA-NC)感染SGC一7901／DDP，作为Lv-shRNA-NC组；空白对照组不做任何处理。以MTT法测定转染后各组细胞对DDP的半数抑制浓度(Ic。)，并以AxnnexinV-PE／7-AAD双染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率及周期分布。应用Westernblot和半定量RT-PCR技术分别对各组细胞中E2F-1、survivin、Bc1．2的mRNA及蛋白水

3、平进行检测。结果与Lv．shRNA．NC组和空白对照组相比，Lv—shRNA-E2F一1组细胞对顺铂的Ic。显著降低，细胞凋亡率显著提高，细胞周期阻滞于GdG期，差别均有统计学意义(尸<0．05)；Lv·shRNA-E2F-1组E2F．1mRNA水平较Lv．shRNA．NC组和空白对照组分别下降45．0％和41．3％，蛋白水平分别下降66．7％和70．5％(均P<0．01)；Lv-shRNA-E2F一1组survivinmRNA水平较Lv．shRNA．NC组和空白对照组分别下降30．3％和28．7％，蛋白水平分别下降56．5％和53．6％(均P

4、<0．01)；Lv．shRNA．E2F．1组Bcl一2mRNA水平较Lv—shRNA．NC组和空白对照组分别下降76．6％和76．8％，蛋白水平分别下降74．6％和79．9％(均P<0．01)；Lv．shRNA．NC组与空白对照组比较，上述指标差别均无统计学意义(均P>0．05)。结论：沉默E2F．1基因可有效提高人胃癌耐药细胞株SGC．7901／DDP对顺铂的敏感性，其机制可能与survivin及Bcl一2表达下调有关，提示E2F．1可能成为胃癌药物治疗的新靶点。关键词：E2F一1；胃癌；cisplatin；化疗敏感性；survivin；Bc

5、l一2EffectsofE2F一1genesilencingoncisplatinchemosensitivityofhumangastriccancerSGC．7901／DDPcellsLNChaoS,YANGlie，WANGXiaotong，XIEYubo2,XIAOQiangDepartmentofGastrointestinalandGlandSurgery,DepartmentofAnesthesiology,FirstAfiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversit~Nanning530021，C

6、hinaAbstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofE2F一1genesilencingonthechemosensitivityofhumangastriccancerSGC一7901／DDPcellstocisplatinandexploretheunderlyingmechanism．MethodsGastriccancerSGC一7901／DDPcellsweretransfectedwiththerecombinantlentiviriIllSvectorLv—shRNA—E2F一1forE2

7、F一1geResilendng,withcellstransfectedwiththecontrolrecombinantlentivirirusvectorLv—shRNA—NCasthenegativecontro1．MTTassaywasusedtoevaluatecisplatinchemosensitivitvofthecells,andthecellapoptosisrateandcellcycledistributionweredetectedbyflowcytometry．ThemRNAandproteinexpressions

8、ofE2F一1andapoptosis—relatedgenes(survivinandBd一21weredetectedbyRT—PCRandWes