DDP对顺铂敏感性的研究.pdf

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1、军医进修学院学报JChinesePLAPostgradMedSchJun2012，33(6)http：／／www．301xuebao．con．cn649Bcl2．siRNA提高人肺腺癌细胞A549／DDP对顺铂敏感性的研究张学林，余秉翔解放军总医院呼吸科，北京100853摘要：目的探讨Bel2一siRNA对人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549／DDP对顺铂敏感性的影响。方法在人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549／DDP细胞中转染bc12一siRNA，48h后加入不同浓度f0、3、6、9、12、15IXg／m1)新鲜配置的顺铂溶液

2、，药物作用48h后，用CCK一8法检测细胞生长抑制率。荧光实时定量PCR(RealtimeRT—PCR)检测A549／DDP细胞转染bcl2一siRNA后Bcl一2mRNA的变化，WesternBlot检测A549／DDP细胞转染bcl2一siRNA后Bcl一2蛋白的变化。结果在A549／DDP细胞中转染bcl2一siRNA后，细胞Bcl一2mRNA降低92．6％(P<0．05)，Bcl一2蛋白表达也明显降低，同时细胞对顺铂的敏感性增加57．8％(P<0．05)。结论Bcl2一siRNA能降低A549／DDP中Bcl

3、一2mRNA及蛋白的表达，增加A549／DDP对Jrbi1~13的敏感性。关键词：A549／DDP；小干扰RNA；Bcl一2；顺铂；耐药中图分类号：R734．1文献标识码：A文章编号：1005—1139(2012)06—0649—04网络出版时间：2012—02—0309：46：22网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／11．3275．R．20120203．0946．002．htmlBcl2-siRNAincreasessensitivityofhumanlungadenoca

4、rcinomaA549／DDPcellstocisplatinZHANGXue—lin．YUBing—xiangDepartmentofRespiratoryMedicine，ChinesePLAGeneralHospital，Beijing100853，ChinaCorrespondingauthor：YUBing—xiang．Email：bingxiangyu@hotmail．com—Abstract：ObjectiveTostudytheefectofBc12一siRNAonsensitivityofcispl

5、atin—resistanthumanlungadenocarcinomaA549／DDPcellstocisplatin．MethodsForty—eighthoursafterBc12一siRNAwastransfectedwithcisplatin—resistanthumanlungadenocarcinomaA549／DDPcells，afreshcisplatinsolutionwaspreparedbyaddingdifferentconcentrationsofcisplatin(0g／ml，3g／m

6、l，6g／ml，9g／ml，12g／ml，15g／m1)intoA549／DDPcellstomeasuretheirgrowth—inhibitionratebyCCK一8assay．ExpressionofBcl一2mRNAandproteininA549／DDPcells—transfectedBc12一siRNAwasdetectedbyRealtimeRT_PCRandWesternblot．respectively．ResultsTheexpressionofBcl一2mRNAandproteininA5

7、49／DDPcells—transfectedBc12一siRNAdecreased92．6％(P<0．05)whilethesensitivityofA549／DDPcellstocisplatinincreased57．8％fP<0．05)．ConclusionBc12一siRNAcandecreasetheexpressionofBcl一2mRNAandproteininA549／DDPcells．andincreasethesensitivityofA549／DDPcellstocisplatin．Keywo

8、rds：A549／DDP：siRNA：Bcl一2：cisplatin；drugresistancesiRNA(smallinterferingRNA)是一种长约21—占80％以上，其五年生存率仅8％一10％，65％患25bp的小RNA分子，由Dicer(RNAsem家族中对者诊断时已为晚期]。铂类药物联合其他化疗药物双链RNA具有特异性的酶)加