Evn一50增强人卵巢癌顺铂耐药株COCl／DDP对顺铂敏感性的研究-论文.pdf

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1、126·中华临床医师杂志(电子版)2013年1月第7卷第2期ChinJClinicians(ElectronicEdition)．January15．2013．Vo1．7。No．2·基础论著·Evn一50增强人卵巢癌顺铂耐药株COC1／DDP对顺铂敏感性的研究蒋静谢宛玉曹建国白军刘登辉【摘要】目的观察黄荆子乙酸乙酯提取物(Evn-50)和顺铂(DDP)在体外对人卵巢癌耐顺铂细胞株COCI／DDP凋亡的影响，探讨Evn-50提高人卵巢癌耐顺铂细胞株COC1／DDP对DDP敏感性的机制。方法运用MTF、FCM、Hoeehst33258染色法、Weste

2、rnblot等方法，观察Evn-50增强DDP抑制COCI／DDP细胞增殖作用和此过程中COC1／DDP细胞凋亡，caspase-3蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)及其泛素化修饰蛋白(Ubi—PCNA)表达的改变。结果Evn-50不仅增强DDP对COCI／DDP细胞的抑制增殖作用，也增强DDP对COC1／DDP细胞的凋亡作用，同时caspase-3蛋白表达增加(P<0．05)；而Evn-50(20g／mr)组与空白对照组相比PCNA蛋白表达下调(P<0．05)，Evn-50与DDP合用组与DDP单药组均出现了Ubi-PCNA蛋白表达，Evn-50与

3、DDP合用组与DDP组比较，Ubi-PCNA蛋白表达下调(P<0．05)。结论Evn一50可能通过减少PC—NA表达，使DDP诱导的PCNA泛素化水平下降，从而逆转DDP耐药，最终通过激活caspase-3蛋白高表达，启动caspase级联反应，增强DDP对人卵巢癌DDP耐药细胞株COC1／DDP的凋亡作用。【关键词】卵巢肿瘤；顺铂；细胞凋亡；Evn-50；逆转耐药Evn-50IncreasethesensitivityofhumanovariancancercelllineCOC1／DDPtodsplatin／nvitroJIANGng，XIEW

4、an-yu，CAOJian-guo，BAIJun，uDeng-hui．DepartmentofObstetricsandGynecology，TheFirstAf-diatedHospitalofTheUniversi~ofSouthChina，ttengyang421001，ChinaCorrespondingauthor：脚Wang—yu，Email：xie·町@163．com【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheefectsoftheacetoacetateextractofVitexnegundoseed(E

5、vn-50)andcisplatin(DDP)ontheinducingapoptosisofovariancarcinomacelllineCOCI／DDPinvitroandthepotentialmechanismofincreasedresponserateofDDPinducedbyEvn-50．MethodsToevaluateEvn-50increasedtheinhibitoryefectofDDPontheproliferationofCOC1／DDPbytheMTrassayandtheapoptoticefectbyHoech

6、st33258stainingandflowcytometricanalysis．Theexpressionsofcaspase一3，proliferatingcellnuclearantigen(PCNA)，Ubi-PCNAwereanalyzedbyWesternblot．ResultsEvn-50increasetheinhibitoryefectofDDPontheproliferationofCOC1／DDPandtheeffectofDDPoninducingapoptosisandtheexpressionofcaspase一3pro

7、teinfP<0．o5)．Yet，theexpressionofPCNAproteindecreasedwithEvn-50usedonlyandincreasedobviouslywithcontrol(P<0．05)．Ubi-PCNAexpressedwhenDDPusedonlyandEvn-50andDDP，theexpressionofUbi·PCNAproteindecreasedwitllEvn-50andDDPandincreasedobviouslywithDDPusedonly(P<0．05)．ConclusionsEvn-50

8、reduceUbi-PCNAexpressionguidedbyDDPthroughdownregulationofPCN