NDRG2 siRNA对宫颈癌Hela细胞顺铂化疗敏感性影响的研究-论文.pdf

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1、中华肿瘤防治杂志2013年1O月第2O卷第19期CHINJCANCERPREVTREAT，October2013，Vo1．20No．19《前沿报道／论著lNDRG2siRNA对官颈癌Hela细胞顺铂化疗敏感性影响的研究杨乐。张健刘军叶。1．西安市中心医院肿瘤科，陕西西安7100032．第四军医大学(放射医学教研室：刘军叶；生物化学与分子生物学教研室：杨乐，张健，刘军叶)，陕西西安710032【摘要】目的：探讨人源N—myc下游调节基因2(N-Mycdownstream-regulatedgene2，NDRG2)小干扰RNA(smal

2、lin—terferingRNA，siRNA)对宫颈癌Hela细胞的化疗增敏作用。方法：利用化学合成的针对NDRG2特异性siRNA借助脂质体转染宫颈癌Hela细胞。采用RT—PCR和蛋白质印迹法检测NDRG2mRNA和蛋白在宫颈癌Hela细胞的表达情况。通过MTT法检测该细胞在顺铂作用下的体外存活率。结果：化学合成的NDRG2特异性siRNAoligomer可使He一1a细胞的NDRG2表达水平明显降低，增强了顺铂对Hela细胞体外生存的抑制能力。转染Negative—controloligomer的Hela细胞与转染NDRG2s

3、iRNAoligomerHSS126269的Hela细胞相比，其存活情况出现明显差异，Ic5o值分别为(6．69±0．33)和(1．69±0．25)／~g／L，差异有统计学意义，t一17．311，P一0．003。结论：抑制NDRG2表达可以提高宫颈癌Hela细胞对顺铂的化疗敏感性，具有一定的临床应用前景。【关键词】宫颈肿瘤；NDRG2；RNA干扰；药物耐受性；顺铂；Hela细胞；印迹法，蛋白质中华肿瘤防治杂志，2013，20(19)：1461—1464E仟ectofNDRG2siRNAsensitivityofcervicaIcan

4、cerHelacellstocisplatinYANGLe，ZHANGJian，LJUJun—ye1．DepartmentofOncology，Xi’anCentralHospital，X’an710003，P．R．China2．FourthMilitaryMedicalUniversity，Xi’an710032，P．R．China[ABSTRACT]OBJECTIVE：ToexploretheeffectsofsmallinterferingRNA(siRNA)specifictoNDRG2onchemosen—sitivity

5、tocisplatinofcervicalcancerHelacells．METHODS：ThesiRNAspecificforNDRG2wassynthesizedandtrans—fectedintocervicalcancerHelacellsbylipofectamine．NDRG2expressioninHelacellswasdetectedbyRT—PCRandWesternblot．MTTassaywasusedtodeterminetheinhibitoryeffectsofcisplatincombinedwit

6、hNDRG2specificsiRNAinvitro．RESULTS：RT—PCRandWesternblotanalysisdemonstratedthatHelacellstransfectedwiththeNDRG2siRNAoligomersignificantlyreducedNDRG2transcriptandproteinlevels．ItincreasedtheinhibitoryeffectsofcisplatintoHelacellsviabilityinvitro．TheIC5oforcisplatininHe

7、la—negativecontrolcellswas(6．69±0．33)／xg·Lbutwasdecreasedalmost4-foldto(1．69±0．25)“g·LinHela-NDRG2一HSS126269siRNAcells．Statisticalanalysisshowedthediffer—enceoftheIC50valuesbetweenthetwogroupstobehighlysignificant(t一17．311，P一0．003)．CONCLUSION：Down-regulationofNDRG2resu

8、ltsinincreasedsensitivitytocisplatinincervicalcancerHelacellsandcanbeusedasapowerfuladjuncttoconventionalchemotherapy