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《miR-106b对HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、JournalofZhengzhouUniversity(MedicalSciences)Sep.2013Vo1.48No.5·637·doi:10.3969/j.issn.1671—6825.2013.05.017miR.106b对HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响饶玉梅△,陈刚,李留霞¨,李秀芳¨,余静丽1)郑州大学第一附属医院妇产科郑州4500522)华中科技大学附属同济医院妇产科武汉430030△女,1974年12月生,博士,主治医师,研究方向:妇科肿瘤,E—mail:raoyumei01@sina.COB关键词miR-106b;宫颈癌;HeLa细胞;顺铂;Twistl;PTEN;
2、p-AKT中图分类号R711.74摘要目的:探讨miR.106b对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法:采用实时定量PCR检测转染miR一106b抑制剂和类似物后HeLa细胞中miR一106b的表达,MTT法及流式细胞仪检测转染后HeLa细胞对顺铂的敏感性和凋亡,Westernblot检测细胞中Twistl、PTEN、p-AKT(Ser473)蛋白的表达。结果:miR一106b抑制剂可减少HeLa细胞中miR.106b的表达;而miR一106b类似物可增加HeLa细胞中miR一106b的表达。转染miR.106b抑制剂后,细胞对顺铂的敏感性增强、凋亡及PTEN蛋白表达增加,Twi
3、stl、p-AKT表达降低(P<0.05);转染miR-106b类似物后,细胞对顺铂的敏感性减弱,凋亡及PTEN蛋白表达降低,Twistl、p-AKT表达增加(P<0.05)。结论:miR一106b可能通过调节Twist1、PTEN和p-AKT的表达影响HeLa细胞对顺铂耐药。EffectsofmiR一106boncisplatinchemosensitivityinHeLacellsRAOYumei¨CHENGang,LILiuxia,LIXiufang¨,YUJingli,)DepartmentofObstetricsandGynecology,theFirstAffiliatedH
4、ospital,ZhengzhouUniversity,Zheng-zhou4500522)DepartmentofObstetricsandGynecology,TongjiHospital,HuazhongUniversityofSci—enceandTechnology,Wuhan430030KeywordsmiR一106b;cervicalcancer;HeLacell;cisplatin;Twist1;PTEN;p-AKTAbstractAim:ToexploretheefectsofmiR一106bonchemosensitivityofHeLacellstocisplati
5、nanditspossiblemechanism.Methods:miR一106binhibitorsandmimicsweretransientlytransfectedintoHeLacells,andtheexpressionofmiR-106bwasdetectedbyreal—timePCR.Then,thedrugsensitivityofcellstocisplatincellapoptosisandtheexpressionlevelsofTwist1.PTENandp-AKTweredetectedbyMTTassay,flowcytometryandWesternbl
6、ot.Results:Theexpres—sionofmiR·106bwassignificantlydecreasedafterthemiR一106binhibitorstransfection,andincreasedafterthemimicstransfectioninHeLacells.Moreover.knockdownofmiR一106bexpressiondramaticallyincreasedcellchemosensitivityandapoptosiseffectsinducedbycisplatinandtheexpressionofPTEN,butdecrea
7、sedthelevelsofTwistlandp-AKTinHeLa(P<0.05).Onthecontrary,overexpressionofmiR一106bsignificantlydecreasedthecellchemosensitivityandapoptosiseffectsinducedbycisplatinandtheexpressionofPTEN,butenhancedthelevelsofTwistlandp
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