PD98059联合顺铂对卵巢癌细胞增殖的影响-论文.pdf

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1、第51卷第2期山东大学学报(医学版)2013年2月Vo1．51No．2JOURNALOFSHANDONGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES)Feb．20l3文章编号：1671—7554(2013)02—0027—06DOI：10．6040／j．issn．1671-7554．2013．02．006PD98059联合顺铂对卵巢癌细胞增殖的影响贾宗洋，张向宁，靳艳慧，魏美玲(山东大学齐鲁医院妇产科，济南250012)摘要：目的观察MEK1／2特异性抑制剂PD98059联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。方法按

2、不同处理因素对卵巢癌SKOV3细胞分组：空白对照组、单纯PD98059组、单纯顺铂组、联合用药组。CCK一8法检测各组细胞的增殖抑制率。实时定量PCR检测各组细胞含有ww结构域的氧化还原酶(WWOX)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)在基因水平的表达。Western—blot检测各组细胞磷酸化ERK1／2(P—ERK1／2)蛋白的表达。光镜下观察各组细胞的生长状态及形态学改变。流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。结果联合用药组细胞增殖抑制率明显高于其他各组(P<0．05)；单纯顺铂组及联合用药组WWOXmRNA表达量较空白对照组明

3、显增加(P<0．05)，单纯PD98059组ww0x表达量无明显改变(P>0．05)；ERKmRNA在各组间的表达无明显变化(P>0．05)；与空白对照组相比，P—ERK1／2表达量在单纯PD98059组及联合用药组中明显降低(P<0．05)，在单纯顺铂组的表达无明显变化。光镜下可观察到空白对照组及单纯PD98059组细胞生长状态好，细胞密集，无明显形态学改变；单纯顺铂组及联合用药组贴壁细胞少，细胞稀疏，联合用药组部分细胞出现胞浆溶解样改变。结论PD98059联合顺铂可能通过调控WWOX基因表达及ERK通路，对卵巢癌细胞增殖

4、产生较强的抑制作用。关键词：卵巢肿瘤；顺铂；ww结构域；氧化还原酶；细胞外调节蛋白激酶中图分类号：R737．31文献标志码：AEffectsofPD98059combinedwithcisplatinderivativeonhumanovariancarcinomacellSKOV3JIAZong—yang，ZHANGXiang—ning，JINYan—hui，WEIMei—ling(DepartmentofObstetricsandGynecology，QiluHospitalofShandongUniversity，Ji

5、nan250012，China)Abstract：0bjectiveToinvestigatetheeffectsofMEK／ERKinhibitorPD98059，cisplatinandthecombinedtreatmentontheproliferationofhumanovariancarcinomacellSKOV3，andtoinvestigatethepotentialmechanism．MethodsCellCountingKit一8(CCK一8)wasusedtoinvestigatetheSKOV3ce

6、llproliferativeinhibitionratesofdifferentgroups：theblankcontrolgroup，thecisplatingroup，thePD98059groupandthecombinedtreatmentgroup．Real—TimePCRwasusedtodetecttheexpressionlevelsofWWdommn—containingOxidoreductase(WWOX)andextracellularregula—tedproteinkinases(ERK)mRN

7、A．WesternblottinganalysiswasusedtomeasuretheexpressionofphosphorylatedERK1／2(P—ERK1／2)indifferentgroups．Themorphologicalchangesofvariousgroupswereobservedunderthelightmicroscope．FlowcytometrywasemployedtoanalyzetheapoptosisrateofSKOV3cellsindifferentgroups．ResultsT

8、heinhibitoryeffectontheproliferationofSKOV3cellsinthecombinedtreatmentgroupwasmoresignificantcom—paredwiththeotherthreegroups(P<0．05)．RT—PCRanaly