体外构建内皮抑素基因真核表达载体抑制血管生成-论文.pdf

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1、中国组织工程研究18卷第292014—07—09出版ChineseJoumalofTissueEngmeefingResearchJuly9，2014Vo1．18,No．29www．CRTER．0憎体外构建内皮抑素基因真核表达载体抑制血管生成邵佳甲’，于音，姜涛。(’长春职业技术学院食品与生物技术分院，吉林省长春市130033；吉林大学白求恩第三医院，神经外二科，。血管外科，吉林省长春市130033)文章亮点：1已有研究构建了重组人内皮抑素(recombinanthUmanEndostatin，thES)l~毕赤酵母真核表达系统；观察邵佳甲，女，1982

2、年生，thES恩度(Endostar)对角膜新生血管及裸鼠乳腺癌MCF-7的抑制作用。吉林省长春市人，汉族，2实验利用内皮抑素能强烈抑制血管生成的特性，构建了具有高效表达endostatin蛋白的重组真核表达质粒2008年吉林农业大学生物工程专业毕业，硕士，pcDNA3．Endo，旨在通过体外实验证实endostatin蛋白能被有效分泌，并强烈抑制血管生成。主要从事制药等相关生物3实验成功构建thES毕赤酵母真核表达系统，使高效表达内皮抑素蛋白成为可能，为thES能有效抑制兔角技术的教学与研究。膜血管生成及裸鼠乳腺癌的生长，提供了临床应用前景的依据。关键

3、词：通讯作者：于音，博士，主治医师，吉林大学白求组织构建：趣管内皮细瞻：内皮抑素；瓯管生或：人晓静咏血管内皮细瑰：阃充质于细跑质粒：转染恩第三医院神经外科，吉主题词：林省长春市130033内皮抑素类；内皮细跑；新生血管化生理性：闻质干细跑doi：l03969~issn2095-4344摘要2014．29．008Ihtp：／hvww．crter．o~g】背景：胶质瘤的根除治疗至今仍是一大难题，抗血管生成治疗胶质瘤有望成为新的有效途径。目的：证实内皮抑素在体外对血管生长的抑制作用，为今后利用其抑制肿瘤生长奠定实验室基础。中图分类号：R318方法：取Wista

4、r大鼠肝脏，提取mRNA后利用RT-PCR获取内皮抑素cDNA片段。碱裂解法小量提取质粒文献标识码：ApcDNA3。重组质粒pcDNA3一Endo的构建。重组pcDNA3-Endo真核表达载体转染骨髓间充质干细胞。RT-PCR文章编号：2095-4344及WesternBlot检测内皮抑素基因的表达。MTT法检测ECV．304细胞增殖抑制实验。体外实验共分成4个(2014)29-04636-06稿件接受：2014-06-26组：重组质粒组、空载质粒组、脂质体对照组及空白对照组。结果与结论：成功构建pcDNA3一Endo重组真核表达质粒，pcDNA3．En

5、do质粒能在体外有效转录并分泌内皮抑素基因，转染了外源pcDNA3-Endo质粒的ECV-304细胞增殖明显受到抑制。结果提示内皮抑素基因能在体外有效抑制血管内皮细胞的增殖。邵佳甲．于音．姜涛．体外构建内皮抑素基因真核表达载体抑裁血管生或中国组织I程磷究．2014．78f29J：4636-4641．ConstructionofpcDNA3一Endoeukaryonexpressionplasmidandangiogenesisinhibition／nvitroShaoJia~ia’，YuYin，JiangTao。(~SchoolofFoodProduct

6、ionTechnologyandBiotechnology,ChangchunVocationalInstituteofTechnology，Changchun130033，JilinProvince，China；DepartmentofNeurosurgerytheThirdAfiliatedHospital(China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity)，Changchun130033，JilinProvince，China；。DepartmentofVascularSurgery,theThirdAfiliat

7、edHospital(China．JapanUnionHospitalofJilinUniversity)，Changchun130033，JilinProvince，China)AbstractBACKGR0UND：Theeradicationtherapyofgliomaisthemajorproblem．andanti-angiogenesistherapyisaShaoJia-jla．Master,Schoolofpotentialtreatmentofglioma．FoodProductionTechnologyandBiotechnology

8、,ChangchunOBJECTIVE：TOconfirmtheinhibiti